地沟油主要指餐厨垃圾中的废弃油脂及煎炸后的回锅油经回收后重新利用的劣质油脂。这些油脂的酸价、过氧化值、重金属含量和油脂的变构分解产物等都显着超过了食用油的国家卫生标准[1 -2],所以摄食会损害人体的健康。据报道，中国目前每年消耗的食用油中，约有 10% 可能来源于废弃食用油脂[3].近几年国内不少报道指出食用地沟油不仅影响人体的胃肠道消化功能，使人产生腹痛、腹泻等症状，长期食用还可能致癌[3 -4],但这些说法尚缺乏实验室直接证据及其与临床病变的相关性分析。本研究拟建立小鼠地沟油灌胃模型，与食用油组小鼠比较，阐明地沟油对小鼠肝、肾功能及脂肪代谢的影响，了解地沟油对人体的可能危害。
1 材料与方法
1. 1 材料 （ 1） 实验动物： 体重为 25 ~ 30 g 的ICR 小鼠 72 只，雌雄各半，购自浙江省医学科学院动物中心。 （ 2） 实验材料： 地沟油由台州市仙居卫生监督所提供； 食用油为某知名品牌二代食用调和油。Model 680 酶标仪购自美国伯乐公司；CA620 动物全自动血细胞分析仪购自瑞典麦道尼克公司； 丙氨酸氨基转移酶试剂盒 （ 赖氏法） 、门冬氨酸氨基转移酶试剂盒 （ 赖氏法） 、血尿素氮试剂盒 （ 除蛋白法） 、血肌酐试剂盒均购自南京建成科技有限公司； 总胆固醇试剂盒 （ 酶法） 、甘油三酯试剂盒 （ 酶法） 购自北京北华康泰临床试剂有限公司； 食用油脂酸价和过氧化值快速测定试纸购自桂林中辉生物技术有限公司。
1. 2 方法
1. 2. 1 实验方法 将 72 只 ICR 小鼠按体重编号后，按 随 机 数 字 表 分 成 灌 油 剂 量 为 5、10 和20 μL / g的食用油对照组和地沟油实验组，每组 12只，雌雄各半，分别以 5、10 和 20 μL/g 的油隔天灌胃，连续喂养 8 周。
1. 2. 2 一般监测 所有小鼠在灌油前测定体重基准值。实验过程中密切关注小鼠进食进水量、毛皮色泽和活动能力等一般状况。灌油开始后每 7 天测定小鼠体重并记录。
1. 2. 3 生化指标检测 所有小鼠在灌油前和灌油8 周后断尾取血，检测丙氨酸氨基转移酶 （ ALT） 、门冬氨酸氨基转移酶 （ AST） 、血尿素氮 （ BUN） 、血肌 酐 （ Scr） 、甘 油 三 酯 （ TG） 和 总 胆 固 醇（ TC） 水平，以评价小鼠的肝、肾功能变化和脂肪代谢情况。检测方法均严格按照试剂盒说明书进行，数据采用酶标仪检测，与标准曲线比对后获得。红细胞相关指标取尾静脉血 25 μL,用麦道尼克 CA620 配套的动物专用稀释液稀释 500 倍，测定红细胞计数 （ RBC） 、红细胞压积 （ HCT） 和血红蛋白 （ Hb） 3 项指标。
1. 2. 4 油脂的理化指标 依据国家食品卫生标准《动植物油脂水分及挥发物含量测定》 （ GB/T 5528-2008） 方法，于 （ 103 ± 2 ） ℃ 加热油样，直至水分完全排除，测得水分损失量，计算油脂水分含量（ %） ; 根据文献 [5] 报道，采用快速测定试纸分别检测食用油和地沟油的酸价 （ mg KOH/g） 和过氧化值 （ g/100 g） ; 比较地沟油和食用油的水分含量、酸价和过氧化值。
1. 3 统计分析 数据以 x ± s 表示，用 SPSS 14. 0软件进行统计分析，采用重复测量方差分析，P <0. 05 为差异有统计学意义。
