学术堂首页 | 文献求助论文范文 | 论文题目 | 参考文献 | 开题报告 | 论文格式 | 摘要提纲 | 论文致谢 | 论文查重 | 论文答辩 | 论文发表 | 期刊杂志 | 论文写作 | 论文PPT
学术堂专业论文学习平台您当前的位置:学术堂 > 化学论文 > 有机化学论文

剂量率对明胶辐射损伤的效应分析

来源:学术堂 作者:姚老师
发布于:2015-05-08 共5242字
摘要

  低剂量率辐照会产生两种效应:低剂量刺激效应和辐射损伤效应。极低剂量率为正效应,可诱导农作物性状改良[1]和品种改良、临床上杀灭癌细胞的同时保护机体细胞。辐射损伤为负效应,可导致DNA双链和单链断裂[2],红细胞及膜损伤[3],胸腺细胞凋亡[4]和癌细胞自我修复增强以及航空、军事和工业元器件[5-6]的应用性能下降。明胶辐照灭菌已沿用传统工艺多年,应用发现,辐照后明胶出现黏度下降的现象。当明胶的初始带菌量高、初始黏度低时,辐照后的明胶细菌含量符合要求,但黏度大幅下降,由此降低或失去应用价值(GB 6783-94要求:明胶勃氏黏度大于1.8mPa·s,凝冻强度大于100g)[7].但这种现象在同等剂量加速器辐照或装源量大的钴源辐照时可避免。因此,研究低剂量率损伤效应具有重要意义。

  水、蛋白质和氧气辐照分解产生OH·、H·、e-aq、HO2·、O-2、RCH·CO-2、NH+3C·(R)CO-2等自由基[8],这些自由基间、自由基与分子间、分子内、分子间会发生多级反应,引起明胶分子的交联、断裂及其他变化[9].由于自由基含有未成对电子,具有自旋角动量,能产生磁性和自旋磁矩[10],常用电子自旋共振(ESR)谱仪检测其信号强度和自由基浓度[11-13].ESR技术主要应用于木荷、丝绸[14]、聚丙烯腈纤维[15]、化学反应研究[16]等领域,用于研究剂量率辐射损伤效应的报道较少。

  本文采用ESR等技术,检测明胶经不同剂量率钴源和加速器辐照后,自由基含量及结构的特性变化,探讨剂量率对明胶辐射损伤的效应,为建立高剂量钴源(或加速器)辐照明胶灭菌工艺提供参考。

  1材料与方法

  1.1主要试剂与仪器

  明胶:CP级,国药集团化学有限公司。

  钴源1:放射性活度1.22×1016Bq(33万Ci),湖北省辐照实验中心;钴源2:放射性活度9.36×1016Bq(253万Ci),深圳市金鹏源辐照技术有限公司;加速器:10MeV、15kW,深圳戈瑞辐照科技有限公司;JES-FA200电子顺磁共振波谱仪:日本电子株式会社;凝胶渗透色谱:1515型高效液相色谱泵、2690D型分离模块、2410型折射率检测器、Waters ultrahy dro-gel 2000型和Waters ultrahy drogel 250型色谱柱,美国Waters公司;Quanta 200型扫描电镜:荷兰FEI公司;TA-XTPlus型质构仪:英国SMS公司;50mL稀释型乌氏黏度计;电子万能材料试验机:深圳市瑞格尔仪器有限公司。

  1.2辐照处理及剂量监测结果

  将明胶在50℃下鼓风干燥至恒重后,进行定量有氧包装。包装后的明胶分别用钴源1(剂量率约为60Gy/min)、钴源2(剂量率约为480Gy/min)和加速器(剂量率约为1 200Gy/min)辐照,以硫酸亚铁剂量计跟踪吸收剂量。加速器工作条件:功率14.97kW、扫描电流7A、速度2.4~3.0m/min、载高3cm、加速电压122kV.钴源1辐照样品的吸收剂量分别为4.5、8.7、13.0、17.3、27.3、36.6kGy,钴源2辐照样品的吸收剂量分别为8.8、20.2kGy,加速器辐照样品的吸收剂量分别为8.0、30.6kGy.

  1.3 ESR工作条件
  
  初始场的磁感应强度为313.894mT,中心磁场的磁感应强度为323.894mT,磁场扫描宽度为20mT,扫描时间为60s,微波频率为9 052.252MHz,微波功率为0.998 000mW,测量温度为室温。

  1.4指标测定

  相对分子质量大小及分布宽度:以0.1mol/mL Na2HPO4(pH=8.0)为储备液,0.025mol/mLNa2HPO4(pH=8.0)为淋洗液,H2O-0.2mol/mLNaNO3为溶剂,进样量为100μL,淋洗液流速为0.6mL/min.标样为聚乙烯乙二醇,柱子温度为40℃,检测器温度为40℃。

  特性黏度:记录在37℃恒温下,一定体积、不同浓度(初始浓度c0及将初始浓度按体积比稀释为2/3、1/2、1/3和1/4浓度)下明胶水溶液流经乌氏黏度计毛细管的时间。根据溶液流出时间t和蒸馏水流出时间t0,依次计算相对黏度ηr(ηr=t/t0)和增比黏度ηsp(ηsp=ηr-1).以浓度c为横坐标、ηsp/c和lnηr/c为纵坐标作图,两条曲线与纵轴的截距记为H1和H2,其平均值为H,H/c0即为特性黏度[η].

  凝胶强度:按美国试验标准GMIA采用质构仪测定。

  断裂伸长率:采用膜的拉伸模式试验标准GB 1040-92进行断裂伸长率的测定。测试条件:定伸长率20%、标距25mm、试验速度100mm/min、定应力0.1mPa、试验面积1.56mm2,测试时输入膜厚度参数(以mm为单位),断裂伸长率由计算机直接给出。

  表面形貌分析:10%的明胶水溶液在低温下形成凝胶后,在-80℃冰箱内速冻,再冻干,取少量冻干样品,真空喷金后,采用扫描电镜对样品的表面和截面扫描。

  2结果与讨论

  2.1辐照明胶的ESR谱特征

  吸收剂量约8kGy的明胶经钴源1、钴源2和12 000Gy/min加速器辐照后,用ESR谱仪研究不同剂量率γ射线和电子束照射后明胶自由基信号的变化,结果示于图1.图1a显示,未辐照明胶的自由基信号很弱,且噪声较大。图1b显示,钴源1和钴源2辐照明胶后,自由基信号强度相近,加速器辐照后自由基信号强度最低,三者均表现出典型的特征双吸收峰,几乎重叠。

  钴源1、钴源2和加速器辐照后吸收剂量分别为36.6、20.2和30.6kGy的样品的ESR谱如图2所示。与8kGy低剂量辐照明胶的ESR谱(图1)相比,随着剂量的增加,三种剂量辐照明胶的峰形无明显变化。吸收剂量较接近的钴源1(36.6kGy)和加速器(30.6kGy)辐照明胶的峰形高且窄,吸收剂量仅为20.2kGy的钴源2辐照明胶的峰形矮且宽。

  根据分裂因子计算公式g=0.071 45γ/H(H为共振场的磁感应强度,γ为微波频率,取9 052.252MHz)和图2计算g值和ΔH(峰与峰对应磁场的间距),结果列于表1.由表1可见,钴源1的特征峰参数与加速器的较接近,钴源2的g值略偏大,ΔH偏小,但差值不大。可见,辐照剂量率并未改变样品的自由基性质,ESR谱峰形相似,未辐照明胶几乎无响应信号。低剂量阶段(图1),高剂量率的低自由基信号强度效应较明显,自由基信号强度由小到大依次为加速器、钴源2、钴源1.

  电磁波或电子束在明胶蛋白质晶格内会产生辐射缺损,诱导长寿命自由基产生,当与周围外加磁场相互作用时,会发生自旋共振吸收。钴源和加速器产生的电子自旋和外加磁场间的相互作用不同,因此形成的谱线线形也略有差异[8,15].本研究发现,二者产生的自由基的特征峰相似,但强度有差异。

  

  2.2剂量对自由基信号强度的影响

  用钴源1对明胶进行不同剂量辐照,研究吸收剂量与自由基信号强度的关系,结果如图3所示。在0~36.6kGy吸收剂量范围内,自由基信号强度(y)与剂量(x)呈现良好的相关性,拟合方程为:y=26.983x2+1 641.8x-205.69,R2=0.994 .当物质受到电离激发时,处于上下两能级的电子发生受激跃迁,一部分低能级电子吸收电磁波能量跃迁到高能级,辐射诱发的顺磁性物质产额与吸收剂量直接相关[18],因此,ESR反映的是一定条件下样品吸收的总能量[19],能量吸收越多,共价键断裂越多,从而自由基含量越高[20].本研究中吸收剂量与信号强度呈正相关,与文献[21]报道的结果一致。

  2.3剂量率对辐照明胶自由基信号强度的影响

  用不同剂量率及辐照方式辐照明胶,其自由基信号强度示于图4.由图4可见,吸收剂量约为8kGy时,钴源1、钴源2和加速器辐照三种方式中,加速器辐照的明胶自由基信号强度最低,钴源1和钴源2辐照的明胶自由基信号强度相近;吸收剂量约为20kGy时,钴源2辐照的明胶自由基信号强度低于钴源1的;吸收剂量约为30kGy时,加速器辐照的明胶自由基信号强度低于钴源1的。可见,相同剂量辐照时,自由基信号强度由高到低依次为:钴源1、钴源2、加速器。

  加速器辐照产生的自由基信号强度低于γ射线的,可能是由于加速器电子束穿透能力有限,且作用时间短,单位时间自由基产生量大,使自由基瞬时浓度太高,难以及时扩散,自由基间发生反应而淬灭,造成自由基总量减少。在钴源辐照中,大剂量率与小剂量率自由基信号强度产生差异与此推理相似,具体机理有待进一步分析研究。

  2.4剂量率对辐照明胶平均相对分子质量的影响

  吸收剂量约为8kGy时,不同剂量率辐照后,明胶流经凝胶渗透色谱(GPC)的信号响应值随时间的变化示于图5.由图5可见,钴源1辐照后明胶的保留时间最长,响应信号峰最矮;加速器辐照与钴源2辐照后明胶的保留时间相近,但钴源2峰较高。由GPC测定原理可知,相对分子质量越大,保留时间越短,峰越高。可见,相同吸收剂量下,钴源2辐照明胶样品平均相对分子质量最大,其次为加速器辐照的,钴源1辐照的最小。

  根据明胶GPC响应值与标准曲线对比,分析得到相对分子质量。钴源1、钴源2和加速器辐照明胶的相对数均分子质量(Mn)分别为2 810、3 875和3 358;相对重均分子质量(Mw)分别为4 389、7 119和5 973;多分散指数(Mw/Mn,用于衡量聚合物分子质量分布的宽度,该值越大,说明分子质量分布越宽,分子质量越不集中)分别为1.56、1.84和1.78.在35~40min之间出现小峰的原因是明胶大分子流出后,小分子保留在树脂孔里,最后才被洗脱出来,倒峰为溶剂峰。由此可见,相同吸收剂量下,辐照明胶的Mn、Mw由大到小依次为:钴源2、加速器和钴源1.但分散指数以钴源1最低,其次为加速器,钴源2最高。

  高分子受辐照后最重要的反应为辐照交联与降解,同时性能发生显著变化,包括分子质量增加或下降。在相对无水条件下,明胶属于辐照降解型高分子,在辐照过程中分子质量逐渐减小。在降解过程中生成大分子自由基,空阻效应使大分子自由基较稳定,它们很难在分子链内迁移,也不易进行分子间的双基复合反应,其主要反应趋势是重排或歧化反应,主链断裂后被稳定下来。这是明胶受γ射线辐照后,产生稳定性较好的自由基的机理。因此,稳定自由基含量可间接反应降解程度。

  2.5剂量率对辐照明胶特性的影响

  不同剂量率辐照后明胶的特性黏度、凝胶强度和断裂伸长率列于表2.由表2可见,未辐照明胶的特性黏度为47.5mL/g,辐照明胶的特性黏度在41~42mL/g范围内,且钴源2和加速器辐照后明胶的特性黏度相近,钴源1辐照后明胶的特性黏度略低。未辐照明胶的凝胶强度为642.8g,辐照明胶的凝胶强度在560~590g范围内,凝胶强度的大小依序为:

  钴源2辐照后的明胶、加速器辐照的明胶和钴源1辐照的明胶。未辐照明胶的断裂伸长率为221.3%,辐照明胶的断裂伸长率范围为160%~200%,断裂伸长率由大到小依序为钴源2、加速器和钴源1.

  

  综上所述,钴源剂量率加大,有利于减少无水明胶蛋白的降解,保持较高的特性黏度、凝胶强度和明胶膜的断裂伸长率。加速器辐照效果略次于钴源2的辐照效果,但优于钴源1的辐照效果。

  有研究[3]表明,高剂量率辐照造成R·和ROO·的浓度相对较高时,自由基间的反应取代了自由基与完整分子间的反应,致使由·OH引发的链式反应蔓延过程受到限制,主要是链终止反应。相反在低剂量率时每个单位时间内几乎均未形成脂质过氧自由基ROO·,而是与相邻完整分子的反应导致链式反应被延长,故低剂量率对蛋白质产生更大程度的损伤。长寿命自由基对照后贮藏期明胶性能的影响有待进行深入、系统的研究。

  2.6剂量率对辐照明胶微观结构的影响

  图6为未辐照明胶和吸收剂量约8kGy的明胶表面放大500倍的扫描电镜图像。由图6可见:未辐照明胶表面有少量凹陷,且有明显未溶解的颗粒状物;三种辐照方式下,明胶表面孔洞数量较未辐照明胶均有所增加,但随着剂量率的增加,孔洞变浅,且逐渐模糊。钴源1辐照明胶表面孔洞稀疏、大、深,基质表面光滑,钴源2和加速器辐照的明胶表面孔洞逐渐变得不明显,且凸起物密集,尤其是加速器。对于孔洞,推测是明胶凝胶在冷冻干燥过程中水分挥发形成的通道。对于突起物,分析是由于明胶溶解性差,在水溶液中分布不均造成的。明胶经不同剂量率辐照相同剂量后,分解反应程度不同,水溶解性不同,分解程度越大,溶解性越好,则凸起物越少,基质越光滑。由6图还可见,剂量率越大,明胶辐照分解越少,表面突起越多。

  3结论
  
  1)未辐照明胶的ESR信号很弱,辐照明胶的ESR谱呈双峰特征,峰高由高到低依次为:60Gy/min钴源辐照的明胶、加速器辐照的明胶和480Gy/min钴源辐照的明胶;2)明胶的平均相对分子质量、特性黏度、凝胶强度、断裂伸长率由大到小依次为:480Gy/min112 000Gy/min加速器辐照的明胶、60Gy/min钴源辐照的明胶;3)明胶的相对分子质量越小,水溶解性越好,SEM图像表面越光滑,因此其表面粗糙程度由大到小的顺序与平均相对分子质量的相同。4)自由基浓度越高,辐射化学反应越激烈,性能劣变程度越大。高剂量率产生低浓度长寿命自由基,有利于减小辐射损伤,其作用机理可能是:瞬时高浓度自由基间反应增加而带来自由基的淬灭,减少了自由基对主链分子的攻击机会。

  具体机理有待进一步脉冲辐解研究加以佐证。

  参考文献:
  [1] 章铁,刘秀清,张金良,等.不同剂量率60Co-γ射线低剂量辐射对小麦农艺性状的影响[J].中国农学通报,2008,2(1):220-223.
  [2] 孔福全,王潇,倪嵋楠,等.Li离子辐射致DNA损伤中的剂量率效应[M]∥中国原子能科学研究院年报.北京:原子能出版社,2007:144-145.
  [3] 王俊玲,王卫东,徐志昆,等.不同剂量率的紫外线对红细胞及其膜的影响[J].核农学报,2009,23(3):526-529.
  [4] 吕喆,刘淑春,刘扬,等.低剂量X线辐射诱导胸腺细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的剂量率效应[J].吉林大学学报:医学版,2003,29(6):719-722.
  [5] 商怀超,刘红侠,卓青青.低剂量率60Coγ射线辐照下SOI MOS器件的退化机理[J].物理学报,2012,61(24):246010.
  [6] 邓伟,陆妩,吴雪,等.双极线性稳压器(LM317)的电离总剂量效应及剂量率的影响[J].固体电子学研究与进展,2013,33(4):398-404.

相关标签:
  • 报警平台
  • 网络监察
  • 备案信息
  • 举报中心
  • 传播文明
  • 诚信网站