阴道炎是女性的常见病、高发病,对妇女群体的健康造成严重影响,而阴道分泌物白带是妇产科常见的循证手段之一[1],白带主要由阴道壁漏出液和脱落的上皮细胞组成,是诊断阴道疾病的主要依据,它能直接反映妇女阴道及宫颈是否存在炎症或感染的情况[2]。pH 值、阴道清洁度、霉菌与滴虫以及线索细胞等是白带常规检查的主要内容,当病人感染滴虫或细菌性阴道炎时,pH 值由正常的4. 5上升至 5 ~ 6; 寄居了病原菌、真菌等病原体时,阴道的清洁度从Ⅰ ~ Ⅱ级变为Ⅲ ~ Ⅳ级。白带常规检查是妇科疾病普查的重要项目之一,对白带进行常规检查能够快速发现威胁妇女健康的疾病,便于对阴道炎做到早发现、早治疗,对妇女健康有着十分重要的意义。
1 资料与方法
1. 1 一般资料本组资料为 2009 -06 ~2014 -06 在我院就诊的 3000 例妇女病人,年龄 19 ~ 55 岁,所有病人均进行阴道分泌物常规检查。由当班医师用无菌专用棉拭子取阴道中适量分泌物,将其直接涂片于清洁无菌的玻片上待干,立即送检。每例标本用三种方法进行阴道霉菌检测。
1. 2 检测方法
1. 2. 1 美蓝染色法 是指用美蓝色液对细菌进行染色以便进行显微镜检查的染色方法。配置方法依据临床医学检验中的标准[3]。用 1g/L 美蓝溶液 1 ~2 滴,将阴道分泌物稀释后再滴加 50g/L 氢氧化钾 1 ~ 2 滴,轻摇玻片,充分混匀,湿片镜检。美蓝染色法具有直接、快速、简便、经济、形态直观、清晰的优点,油镜观察白带常规的清洁度在Ⅰ ~ Ⅳ级,镜检 5 ~8 个视野。
1. 2. 2 生理盐水湿片法 将取出的阴道分泌物与少量生理盐水混合涂片镜检,如需必要,可加一滴2. 5mmol / L 氢氧化钾溶液。
1. 2. 3 革兰染色法 将取出的阴道分泌物标本直接涂抹于干燥玻片上,涂布均匀,在火焰上加热以杀死菌种并使其黏附固定,进行革兰染色,镜检。
1. 3 观察指标对比三种检测方法的阴道霉菌检测效果。统计使用美蓝染色法的霉菌、滴虫、线索细胞检测结果。清洁度Ⅰ ~ Ⅱ级表示白带常规检查正常,清洁度Ⅲ ~ Ⅳ级表示有阴道炎。
2 结果
2. 1 三种检测方法霉菌检出率( 见表 1)3000 例送检标本中,美蓝染色法检出霉菌 606例,阳性率为20. 2%,生理盐水湿片法检出霉菌503 例,阳性率为16. 8% ,革兰染色法检出霉菌 609例,阳性率为20. 3%。【1】
2. 2 美蓝染色法检出霉菌形态( 图 1 ~ 2)2. 3 美蓝染色法病原菌检查结果( 见表 2)3000 例标本中,共检出阳性标本 1631 例,总阳性率为54. 3%,其中霉菌 606 例,线索细胞 556例,滴虫 469 例,未见异常 1369 例。
2. 4 阴道清洁度检查结果( 见表 3)3000 例标本中,Ⅰ ~ Ⅱ级 1906 例,占总标本数的 63. 5%,Ⅲ ~ Ⅳ 级 1094 例,占 总 标 本 数的36. 4%。【2】
3 讨论
霉菌性阴道炎是妇科常见病、多发病且复发率高,诱因多,根治困难,若不能明确病原体就达不到理想的治疗效果,而且还有可能诱发耐药性和菌群失调。因此,阴道炎的检出准确性是非常重要性。
寻找一种检测准确率高的方法对于临床诊断与治疗有着重要的意义。而对女性阴道清洁度、霉菌、滴虫的检查可以直接反应出女性阴道或宫颈是否存在炎症和是否有感染的情况发生,其简便、快捷、准确的优点受到临床广泛的重视和应用。清洁度级别的划分为临床医师的评估提供了较准确的依据[4 ~6]。
虽然直接涂片能够较快的观察到活动的毛滴虫,但是对于细菌和真菌的形态和特征还不能明确的观察,美蓝染色可以弥补其不足,经染色后,形态更加直观、清晰。原因可能在于[7],美蓝染色可以将霉菌的芽生胞子和假菌丝染上蓝色,使其形态更加典型、突出。浅蓝色的阴道上皮细胞和白细胞形态更加清楚、直观,容易辨别。而加入氢氧化钾可以对坏脓细胞、上皮细胞及黏液丝等有形成分造成破坏,益于丝霉菌的检出。美蓝染色法与革兰染色法相比,检测效果大致相当,但是二者相比,美蓝染色法耗时更短,操作更加简单快捷[8 ~11]。
本研究中,通过对 3000 例阴道分泌物送检标本进行检查,共检出阳性标本 1631 例,总阳性率为54. 3% ,其中霉菌 606 例( 20. 2% ) ,线索细胞 556例( 18. 5%) ,滴虫 469 例( 15. 6%) ,未见异常 1369例。Ⅰ ~ Ⅱ级 1906 例,占总标本数的63. 5%,Ⅲ ~Ⅳ级 1094 例,占总标本数的36. 4% 。霉菌的检出数明显高于其他病原菌,霉菌感染已成为导致女性阴道感染中最为常见的阴道炎症之一,不容忽视[12,13]。霉菌性阴道炎具有多发性,镜下可见卵圆形芽生细胞和假菌丝,通常存在于人的口腔、上呼吸道以及生殖器阴道黏膜上,是一种条件致病菌。霉菌是由白色念珠菌感染所致,喜欢在酸性环境中生长,而当机体免疫功能降低或正常寄居的微生物间相互制约作用失调,导致酸碱平衡失调,就容易引起念珠菌病。长期应用广谱抗生素的人由于阴道中糖原增多而导致酸度提高,而使得白色念珠菌得以繁殖进而引起了感染[14,15]。妇女群体应重视健康体检,做到疾病的早发现、早治疗,养成良好的卫生习惯,降低霉菌性阴道炎的发病率。
在临床检验中,美蓝染色法对霉菌的检出率明显高于生理盐水湿片法,推荐常规检时采用美蓝染色法取代生理盐水湿片法,而不使用革兰染色法的原因是因为它耗时长,操作复杂,二者的检测效果区别不大,但是与美蓝染色法相比,革兰染色法不够快捷,简便。
参考文献
[1]李怡茹,郭春悦,杨静. 白带常规检查中加入 10% koh稀碱前后结果分析[J]. 中国民族民药,2010; 11( 30) :23 - 25
[2]张惠玲,黄海雁,梁雪琼,等. 白带标志物多项检查对妇科病筛查的临床应用[J]. 社区医学杂志,2010; 11( 20) : 159 -160
[3]朱忠勇. 陈之航. 临床医学检验[M]. 上海: 上海科学技术出版社,2003: 428
[4]汤宏顺. 2009 年我院门诊及病房送检白带常规 874 例结果分析[J]. 亚太传统医药,2010; 4( 15) : 654 -655
[5]孟双艳. 2835 份阴道分泌物病原检测方法及结果分析[J]. 医学临床研究,2007; 24( 8) : 1423 -1424
[6]李川,江竹,孙梅. 妇科白带涂片多项检查快速染色技术的临床应用[J]. 医学文选,2005; 24( 2) : 199 -200
[7]梅丽玲. 亚甲蓝溶液检测阴道霉菌的临床应用[J]. 临床检验杂志,2001; 19( 2) : 119
[8]陈静,梁启中,邓光贵. 阴道分泌物常规检查方法联合应用的分析[J]. 国外医学临床生物化学与检验学分册,2005; 26( 1) : 4 -5