解冻去甘油红细胞常用于Rh阴性的稀有血型血液,为满足临床Rh阴性患者的病情需求,本站于2007年开展了Rh阴性红细胞的机器制备冰冻保存和解冻技术,自从2010~2012年共计418例机制去甘油解冻红细胞,在机制去甘油解冻红细胞的过程中,出现了3例游离血红蛋白<1g/L、2例游离血红蛋白>1g/L(机器诊断值应在<0.5g/L),1例游离血红蛋白>1.5g/L,对其进一步对照鉴定、分析,结果如下.
材料与方法
1血液来源自2010年1月~2012年3月418例解冻红细胞中,抽取126例比较,其中120例终末游离血红蛋白值<0.5g/L,5例游离血红蛋白<1g/L,1例游离血红蛋白>1.5g/L.
2试剂和耗材40%的红细胞低温甘油保护剂320ml(北京博德桑特生产),9%的浓氯化钠溶液160ml(北京博德桑特公司生产),羟乙基淀粉40氯 化钠注射液400ml(四川科伦药业公司生产),0.9%氯化钠溶液1600ml(四川南格尔生物医学股份有限公司生产),235型解冻红细胞耗材(美国血液技术公司生产).
3仪器和设备冰冻用的-85℃冰柜(日本三洋生产),37℃恒温水浴血浆解冻箱(苏州医用仪器厂生产),日立离心机(日本生产),215型全自动红细胞处理仪(美国血液技术公司生产).
4红细胞的保存将冷藏保存1~6d的去白红细胞悬液2单位,以6℃、10min、3000r/min条件进行制备离心,彻底去除红细胞添加液和少量血浆,以无菌对接到专用耗材上,安装到215型全自动红细胞处理仪中,选择冰冻程序,10min内加入低温甘油保护剂320ml,再静置于冷台上30min后配平,6℃、2000r/min、6min离心,去除多余甘油约80ml,用无菌接口机对接到专用的冰冻红细胞保存袋内进行冰冻保存.
5红细胞的解冻将冰冻状态的阴性红细胞立即放入37℃的恒温水浴箱中化14min(2单位),融化好后称重,对接到ACP215解冻红细胞处理仪的专用器材上,选择解冻程序,严格按照程序操作机器,依次加入9%浓氯化钠溶液160ml、羟乙基淀粉40氯化钠注射液400 ml、0.9%等渗氯化钠1600ml,最终游离血红蛋白(Hb<0.5g/L)目测上清液清晰者即投入临床使用.
6干预方法为避免误判产品结果,需要机测值结合手工质控进一步干预比对;机测值游离血红蛋白Hb<0.5g/L、目测清晰者可以直接发往临床;机测值游离血红蛋白Hb<1g/L、质控值游离血红蛋白Hb<1g/L、目测清晰者,可以发往临床;机测值游离血红蛋白Hb>1g/L、质控值游离血红蛋白Hb<1g/L、应结合离心法加一次洗涤,目测清晰者可以直接发往临床;机测值游离血红蛋白Hb>1.5g/L、质控值游离血红蛋白Hb>1g/L、该Rh阴性血液不可以向临床发放.
7国标质量标准终末游离血红蛋白(Hb<1g/L)可以发往临床使用[1].
8统计学处理计量资料机测值与质控值以珚x±s表示,计数资料采用χ²检验.
结果
1在抽取的126例阴性解冻红细胞中,有125例游离血红蛋白值(Hb<1g/L),符合国标要求,结果合格发往临床,有1例游离血红蛋白值(Hb>1.5g/L),结果不合格报废.
120例机测正常值Hb<0.5g/L,与其他3组机测异常值(Hb<1g/L、Hb>1g/L、Hb>1.5g/L)比较,差异有统计学意义(P<0.01);机测值与质控值合格率比较,差异无统计学意义(P>0.05).
2 126例阴性解冻红细胞的结果见表1、2
讨论
ACP215血细胞自动处理仪制备Rh阴性红细胞终末游离血红蛋白机器测定值应该Hb<0.5g/L.根据统计学分析有显着意义,实际操作存在有上述四种情况,根据笔者在血站制备情况最终结果,机制Rh解冻红细胞最终结果:①机测正常组游离血红蛋白(Hb<0.5g/L)结合目测上清液清晰即可投入临床使用;②机测异常Ⅰ组出现机制解冻红细胞最终结果游离血红蛋白(Hb<1g/L)结合目测上清液清澈者,为预防机器误诊情况,应结合留取血样离心法对照上清液颜色和结合质控值对比,结果游离血红蛋白(质控测定Hb<1g/L)离心血样目测上清液清晰者,可用于临床使用;③机测异常Ⅱ组出现机制解冻红细胞最终结果游离血红蛋白(Hb>1g/L)结合目测上清液发红者,为预防机器误诊情况,应结合留取血样离心法,进行手工洗涤一次,对照上清液颜色和结合质控值对比,结果游离血红蛋白(质控测定Hb<1g/L)离心血样目测上清液清晰者,可用于临床使用;④机测异常Ⅲ组游离血红蛋白(Hb>1.5g/L、手工质控测定Hb>1g/L)上清液发红、离心目测不清晰者就需要报废该机制解冻红细胞制品.总之制备机制Rh阴性解冻红细胞的每个环节均要严格按照操作规程进行,谨慎分析,仔细把关,既要确保临床患者输注的安全性,不可盲目发往临床,又要减少不必要的血液资源浪费.RhD(-)阴性血在我国汉族人群中仅占0.3~0.4%[2],冰冻解冻红细胞对临床上稀有血型的输血、自身贮血、减少输血的不良反应等具有重要意义[3].自Smith首先发现低温保存红细胞方法,并用甘油作为保护剂冷冻保存红细胞试验成功以来,该方法经过多年的研究,得到不断的改进,现已成为现代输血中唯一能长期保存红细胞的方法,保存期可达几年.更重要的是为稀有血型患者的输血提供了方便,将平时采集的Rh阴性血液冻存贮备,一旦需要可立即解冻洗涤,有效解决稀有血型患者的临床用血问题,应采用先进的设备和技术,以最快速度将Rh阴性血液发往临床,争取抢救时间[4],取得了良好的治疗效果.
参考文献
1中华人民共和国国家标准GB18469-2012[S].全血及成分血质量要求[S].5,8.
2兰 炯采,张德梅,张印则,等.再论RhD(-)患者的科学安全输血[J].中国输血杂志,2009,22(5):341-342.
3杨成民.基础输血学[M].中国科学技术出版社,2001:670.
4徐树良,王春宁,陈宁娟,等.扩容降渗法快速洗涤冰冻甘油红细胞的研究[J].中国输血杂志,2008,21(2):120-121.
