摘 要： 目的 评价儿童25-羟基维生素D[25-(OH)D]水平对骨代谢的影响，探究其临床价值。方法 回顾性分析天津市妇女儿童保健中心2019年10月—2020年10月接受健康体检和治疗的7 750例0～7岁儿童的检查资料，对其25-(OH)D的水平分布情况及不同检测结果、血清骨型碱性磷酸酶（BALP）以及儿童的骨代谢情况差异进行分析。结果≤2岁的儿童25-(OH)D水平明显高于3～7岁受检儿童，3～<5岁儿童25-(OH)D水平明显高于5～7岁的儿童；秋冬儿童25-(OH)D水平明显低于春夏受检儿童；25-(OH)D充足组儿童的骨强度Z分数值均明显高于25-(OH)D不足组及25-(OH)D缺乏组的儿童，25-(OH)D不足组明显高于25-(OH)D缺乏组的儿童；25-(OH)D充足组儿童的血清BALP检出正常率较其他两组更高，检出血清BALP水平轻度增高及中度增高的占比明显低于25-(OH)D不足及25-(OH)D缺乏两组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 维生素D对儿童骨代谢具有重要影响，检测25-(OH)D水平有利于发现其骨代谢异常状况，并抓住早期干预治疗时机，对其健康成长、降低佝偻病发生率具有较高价值。
关键词 : 25-羟基维生素D;儿童;骨强度;血清骨型碱性磷酸酶，
儿童期是人体生长发育的重要阶段，而维生素D是促进儿童钙质吸收的重要影响因素。维生素D是一组结构上与固醇相关，能够有效防止佝偻病形成的维生素，其中起主要作用的是维生素D2和维生素D3[1]。维生素D在人体中能够加速小肠黏膜细胞对钙和磷的吸收，能够诱导钙结合蛋白的合成以此来促进人体对钙离子的吸收[2]。维生素D作为一种脂溶性维生素，是人体钙磷调节的重要元素，不仅与儿童骨骼健康存在明显关系，对其骨骼生长发育以及肌肉发育均存在明显影响。骨强度能够对人体骨质量状况及钙营养进行反映，是目前临床上用于检测人体骨骼发育状况及骨矿物质水平的重要指标。血清骨型碱性磷酸酶（BALP）是由成骨细胞合成的指标，当骨细胞转化为成骨细胞时其活性会逐渐下降至消失，但是当骨矿化及骨形成产生障碍时其活性则会不断升高，是儿童佝偻病产生的敏感指标[3]。本研究通过对我中心7 750例0～7岁儿童的25-羟基维生素D[25-(OH)D]检测结果、骨强度及BALP差异进行分析，探究25-(OH)D检测的临床应用价值，报告如下。
1、 资料与方法
1.1、 一般资料
回顾性分析2019年10月—2020年10月在我中心接受健康体检和治疗检查的7 750例0～7岁儿童的检查资料，其中有男童4 154例，女童3 596例；平均年龄（5.24±2.35）岁。纳入标准：所有检查儿童均未见明显身体发育畸形，无骨骼、肝肾功能及凝血功能障碍；所有儿童临床检查相关资料完整；纳入分析儿童均为0～7岁儿童，均不存在严重先天性疾病或恶性肿瘤等严重疾病。排除标准：儿童依从性差，未能完成检查；受检儿童存在明显的感染性疾病且未经有效控制；临床检查相关资料缺失。
1.2、方法
留取受检儿童指尖末梢血0.2 ml于肝素抗凝试管中，进行离心处理后留取上层清液储存于2～8℃环境中待检，并在14 d之内完成检测，使用25-(OH)D酶联免疫吸附法检测试剂盒[生产厂家：欧蒙医学诊断（中国）有限公司，货号：EQ 6411-9601]和全自动间接免疫荧光操作/酶联免疫一体机[生产厂家：欧蒙医学诊断（中国）有限公司，型号：Sprinter XL]进行检测，将所有试剂在18～25℃环境中平衡30 min，将校准品、质控品以及待检血清样品各取25μl加入1 000μl含有生物素工作液的稀释液中，震荡10 s使其混匀后将200μl混匀的液体上样并在18～25℃环境下孵育2 h。使用稀释后的缓冲液在反应微孔中保留30～60 s后将其倒掉，使用倒置反应微孔板拍打将残存清洗液去除并重复上述操作3次。向其中滴加100μl经过氧化物标记的链酶亲和素，滴加需包括所有反应微孔，18～25℃环境下温育30 min后进行洗板。在每个反应微孔中加入100μl底物液在避光环境下于18～25℃环境下温育15 min，待其反应完成后向其中加入100μl反应终止液，30min内将反应微孔板轻轻振动使液体扩散均匀后进行比色，对每个样品进行反复测定后将其检测平均值作为检测结果。
血清BALP检测使用骨源性碱性磷酸酶试剂盒进行检测，严格按照试剂盒要求实施检测操作，依据人工目测结合标准比色板进行结果判读。骨强度检测使用OMNISENSE骨强度仪进行检测，>3岁的儿童使用腕骨测量法，≤3岁的儿童使用胫骨测量法进行检测。
1.3 、观察指标
依据《儿童微量元素缺乏防治建议》[4]的相关标准分析所有受检儿童25-(OH)D含量差异，血清25-(OH)D含量在20～100 ng/ml为充足，含量在15～20 ng/ml为不足，<15 ng/ml为缺乏。血清BALP及骨强度检测结果评价以检测指导信息为参考：血清BALP检测结果判断标准为≤200 U/L为阴性（正常），>200～250 U/L为（阳性）轻度增高，>250 U/L为（阳性）中度增高。骨强度以Z分数值表示，Z值>0时骨强度为健康状态，-1<Z值<0时为骨强度偏低，-1.5<Z值<-1为轻度骨强度不足，-2<Z值<-1.5时中度骨强度不足，Z值<-2时为严重骨强度不足。（1）比较不同年龄阶段、不同季节25-(OH)D的水平差异。（2）比较不同25-(OH)D水平儿童的骨强度Z分数值、BALP。
1.4 、统计学处理
使用SPSS 21.0软件对研究中的相关统计数据进行分析，计量数据用表示，多组差异检验使用方差，两组单独检验使用t检验，计数资料使用n（%）表示，组间比较以χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 、结果
2.1 、不同年龄阶段儿童25-(OH)D检测结果
≤2岁的儿童25-(OH)D水平明显高于3～7岁受检儿童，3～<5岁儿童25-(OH)D水平明显高于5～7岁的儿童，组间比较差异有统计学意义（P<0.05），见表1。
2.2 、不同季节儿童25-(OH)D检测结果比较
秋冬儿童25-(OH)D水平明显低于春夏受检儿童，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。
2.3、 不同25-(OH)D含量儿童骨代谢指标比较
表1 不同年龄阶段儿童25-(OH)D检测结果比较
注：与≤2岁组比较，t=37.558,43.123,a P<0.05；与3～<5岁组比较，t=13.403,b P<0.05。
表2 不同季节儿童25-(OH)D检测结果比较
25-(OH)D充足组儿童的骨强度Z分数值明显高于25-(OH)D不足组及25-(OH)D缺乏组的儿童，25-(OH)D不足组间明显高于25-(OH)D缺乏组的儿童，差异有统计学意义（P<0.05），见表3。
2.4 、不同25-(OH)D含量儿童血清BALP指标比较
表3 不同25-(OH)D含量儿骨强度比较
注：与25-(OH)D充足组儿童比较，a P<0.05；与25-(OH)D不足组儿童比较，b P<0.05。
25-(OH)D充足组儿童的血清BALP检出正常率较其他两组高，检出血清BALP水平轻度增高及中度增高的占比明显低于25-(OH)D不足及25-(OH)D缺乏两组，比较差异有统计学意义（P<0.05），见表4。
3 、讨论
表4 不同25-(OH)D含量儿童血清BALP指标比较[n(%)]
注：与25-(OH)D充足组儿童比较，a P<0.05。
维生素D是儿童成长发育过程中不可或缺的微量营养素之一，对维持机体钙磷代谢平衡及血钙水平稳定具有十分重要的作用。随着临床研究的不断深入，有研究指出保证儿童维生素D的充足对促进儿童健康成长，降低佝偻病产生具有明显的作用[5]。人体补充维生素D的途径较少，只有一小部分来源于日常食物的摄入，大部分是通过阳光照射皮肤产生，随着儿童户外活动的减少，目前临床上出现维生素D缺乏的儿童人数不断增加，这对其生长发育产生了较大的影响[6]。维生素D通过对肠道及肾脏的钙吸收以及对骨骼形成过程进行干预发挥其维持机体钙平衡的作用，因此在骨骼的生长及发育过程中保证维生素D充足意义重大。
本研究结果显示，3～7岁尤其是5～7岁受检儿童25-(OH)D水平相对更低，其维生素D缺乏状况更严重，提示该阶段儿童应当注意维生素D补充。我们国家建议0～2岁的儿童应当补充维生素D滴剂，常规补服到2周岁，经过数十年努力，该阶段患儿维生素D缺乏状况明显改善，但是对学龄期儿童维生素缺乏状况重视尚且不足，因而重视该阶段儿童维生素缺乏状况并针对性补充维生素D摄入具有重要意义[7]。此外春夏季节的儿童25-(OH)D检测水平明显较秋冬季节更高，这可能与天气季节变化存在关系，日照是人体补充维生素D的重要途径之一，春夏季节儿童可以经常到室外通过紫外线照射来补充维生素D，但是秋冬季节阳光照射减少加之天气寒冷因此儿童室外活动减少，通过阳光产生维生素D的概率减少，因而更加容易出现25-(OH)D缺乏状况。从不同25-(OH)D水平儿童骨代谢状况来看25-(OH)D充足组儿童的骨强度Z分数值明显高于25-(OH)D不足及缺乏的儿童，而随着缺乏程度加重血清BALP检出正常概率下降，进一步说明了维生素D缺乏对儿童骨骼生长发育的影响作用明显，因此有效补充维生素D对促进儿童成长发育健康具有重要意义。
临床体检中检测儿童25-(OH)D水平对及时发现其骨代谢异常状况并进行维生素D的补充，对避免儿童产生骨骼发育障碍、降低佝偻病产生风险具有较高的价值。有探究指出针对高原地区的儿童进行研究发现其25-(OH)D水平与儿童骨强度之间存在明显关系，与本研究结果吻合，同时也指出补充维生素D对儿童成长发育的意义重大[8]。本研究通过对0～7岁儿童的25-(OH)D检测及其与儿童年龄及季节的关系进行分析并对其儿童骨代谢指标的影响说明了维生素D的重要性，但是研究中未能对其他相关指标的影响进行深入研究，同时也未能纳入维生素治疗效果的观察，具有一定的局限性，在之后的研究中应当进一步完善相关资料进行深入研究，为临床维生素D补充治疗提供更加详细的借鉴资料。
综上所述，维生素D对儿童骨代谢情况具有重要影响，检测其25-(OH)D水平有利于发现其骨代谢异常状况并及时进行干预治疗，对其健康成长，降低佝偻病产生具有较高价值。
参考文献
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