摘 要： 为了掌握海晏县青海湖乡牛病毒性腹泻病毒 (BVDV) 的感染情况, 试验采用RT-PCR法对2017年～2018年采集于海晏县青海湖乡临床中表现出腹泻症状的76份牛粪便样品开展了BVDV的流行病学调与分析, 结果共计检测出阳性粪便样品21份, BVDV平均阳性感染率为27.63%。说明海晏县青海湖乡牛群中存在BVDV的感染与流行, 且流行情况较严重, 应加强重视。
关键词： 海晏县青海湖乡; 牛病毒性腹泻病毒; 流行病学调查;
目前, 牛病毒性腹泻病呈全球性分布, 多数养牛国家均存在该病的发生与流行, 临床中多数以亚临床症状为主, 即主要表现为牛群生长缓慢, 其生产力和经济活力降低, 最终导致免疫抑制和隐性感染, 给该病的防控和净化增加了很大困难[1]。本研究对海晏县青海湖乡开展了BVDV的流行病学调查与分析, 旨在全面掌握海晏县青海湖乡BVDV的感染现状, 为该地区BVDV的综合防控和净化措施的制定提供参考依据。
1 、材料与方法
1.1、 试剂盒来源
牛病毒性腹泻病毒RT-PCR试剂盒购自上海雅吉生物科技有限公司。
1.2、 临床样品的采集与处理
2017年～2018年采集于海晏县青海湖乡临床中表现出腹泻症状的76份牛粪便样品, 将新鲜粪便打入到5倍体积的生理盐水中, 经反复碾磨后, 以12000rpm离心5min, 上清液即为处理后的临床样品。
1.3、 RT-PCR扩增与检测
利用牛病毒性腹泻病毒RT-PCR试剂盒分别对处理后的76份临床样品进行RT-PCR扩增, RT-PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测分析, 根据试剂盒说明书的标准要求, 当RT-PCR扩增产物在290bp处具有特异性DNA扩增条带时, 判定为BVDV阳性;当RT-PCR扩增产物在290bp处无特异性DNA扩增条带时, 判定为BVDV阳性。
2、 结果与分析
如表1所示, 76份临床样品中共检测出BVDV阳性样品21份, BVDV平均阳性感染率为27.63%。其中2017年的平均阳性感染率为22.86%, 2018年的平均阳性感染率为31.71%, 2018年的阳性感染率较2017年提高了8.85个百分点。该结果表明海晏县青海湖乡存在BVDV的感染与流行, 且流行情况较严重, 应加强重视。
表1 临床样品的检测结果
3、 讨论
近几年来我国研究学者对不同地区BVDV的感染现状进行了大量的流行病学调查。闫占云等[2]采用RT-PCR方法对青海省湟中县开展了BVDV的流行病学调查与分析, 共计检测了湟中县内11个乡镇的138份腹泻牦牛粪便样品, BVDV平均阳性感染率达44.93%, 其中湟中县内的11个乡镇中均存在BVDV的感染与流行, 以鲁沙尔镇的阳性感染率最高, 为63.64%, 以田家寨镇的阳性感染率最低, 为25.0%。宋维彪等[3]采用RT-PCR方法对青海省海北州开展了BVDV的流行病学调查与分析, 共计检测了青海省海北州下属4个县的126份具有腹泻症状的牦牛粪便样品和256份未见腹泻症状的健康牦牛粪便样品, 临床表现出腹泻症状的牦牛群中BVDV的平均感染阳性率为51.59%, 临床未表现出腹泻症状的健康牦牛群中BVDV的平均感染阳性率为14.06%。陈新诺等[4]采用RT-PCR方法对四川和西藏部分高原地区开展了BVDV的流行病学调查与分析, 共计检测了149份临床腹泻牦牛粪便样品, BVDV的平均阳性感染率达19.46%, 其中西藏地区BVDV的阳性感染率为27.14%, 四川地区BVDV的平均阳性感染率为12.66%。本研究采用RT-PCR方法对海晏县青海湖乡开展BVDV的流行病学调查与分析, 共计检测了76份临床中具有明显腹泻症状的牛粪便样品, BVDV的平均阳性感染率达19.46%, 与闫占云等[2]、宋维彪等[3]、陈新诺等[4]的流行病学调查结果表现出了高度的相似性, 共同表明当前我国不同地区牛群中均存在BVDV的感染与流行, 且感染率在部分地区较高, 部分地区的感染情况较严重, 应引起高度重视。
参考文献
[1]段进刚, 雷程红, 葛婷, 等.牛病毒性腹泻病诊断技术的研究进展[J].黑龙江畜牧兽医, 2018 (1) :93-96.
[2]闫占云, 吕秉林, 拉加, 等.青海省湟中县牦牛病毒性腹泻5种相关病原的检测与分析[J].畜牧与兽医, 2019, 51 (1) :88-92.
[3]宋维彪, 马存寿, 郭俊梅, 等.青海省海北州2016-2017年牦牛感染牛病毒性腹泻病毒、牛肠道病毒的病原学调查与分析[J].黑龙江畜牧兽医, 2019 (2) :88-90.
[4]陈新诺, 肖敏, 阮文强, 等.川藏地区牦牛牛病毒性腹泻病毒分子流行病学调查及分离鉴定[J].畜牧兽医学报, 2018, 49 (3) :606-613.
