前言
支原体（Mycoplasma）是一类介于病毒和细菌之间，能自行繁殖的最小原核微生物。解脲脲原体（Ureaplasma urelyticum,UU）是人类泌尿生殖道携带率很高的支原体，孕期女性携带率高达 60%-70%.男性泌尿生殖道支原体感染可能与非淋菌性尿道炎、前列腺炎、附睾炎和获得反应性关节炎等疾病有关；女性泌尿生殖道支原体感染可能与前庭大腺脓肿、细菌性阴道病、盆腔炎、产褥热等有关。由于临床上不规范使用或滥用抗生素等原因，解脲脲原体的耐药性不断变化.为了观察解脲脲原体的耐药性变化情况，指导临床药物选择，我们对 2008 年和2012 年的解脲脲原体药物敏感性的变迁进行了研究。
1 资料与方法
1.1 标本来源
标本均来上海市皮肤病医院和上海第二军医大学长海医院门诊诊治的非淋菌性尿道炎、宫颈炎和前列腺炎等泌尿生殖道炎症患者。2008 年研究 450 例，其中男性 210 例，女性 240例，年龄 15~61 岁（平均 30.38 岁）；病程 1 周~5 年。2012 年研究 459 例，其中男性 217 例，女性 242 例，年龄 17~69 岁（平均30.48 岁）；病程 1 周~4 年。男性表现为尿道口红、尿道刺痒、不同程度的灼痛，少量浆液性分泌物或晨起有糊口现象；女性表现白带稍多，慢性宫颈炎症状或无明显症状。所有患者至少 2周内未使用抗生素。
1.2 标本采集
男性患者取尿道分泌物：尿道口消毒后，用无菌棉拭子插入尿道 2-3 cm 轻轻转动后取出，女性患者取宫颈分泌物：先用无菌棉签拭去宫颈口分泌物，然后用一次性女用拭子插入宫颈口 2~4 cm 处停留 10~20 s,旋转 2~3 圈，取出标本立即送检。
1.3 主要试剂
UU 液体培养基和固体培养基，UU 液体培养基和固体培养基参照文献配置。抗菌药物选用强力霉素、交沙霉素、阿齐霉素和氧氟沙星；其标准品均购自 Sigma 公司。
1.4 检测方法
1.4.1 UU 分离培养和鉴定 将标本洗入预先配置好的液体培养基，置 37℃温箱、5%CO2和 90~95%N2环境中培养 24~48小时。液体培养基颜色由浅黄色变成红色，但培养液仍澄清，表示阳性；然后接种于固体培养基上，在低倍显微镜下（放大 40倍）固体表面观察到有支原体典型的棕褐色颗粒状或团块样 U-U 菌落为 UU 阳性。
1.4.2 UU 的体外药敏试验 采用微量肉汤稀释法，根据参考文献具体操作。UU 对体外抗菌药物敏感性判断标准：参考美国临床实验室标准化协会制定的抗菌药物敏感性试验相关执行标准，制定本研究中 4 种常用抗菌药物耐药标准如下：交沙霉素、强力环素 MIC 值≧8 μg/mL 为耐药菌株，氧氟沙星、阿齐霉素 MIC 值≧4 μg/mL 为耐药菌株。
1.5 统计学分析
采用 SPSS 16.0 软件包，对实验数据进行 chi-square test 等处理，比较 2008 年和 2012 年相应组别数据的差异性。
2 结果
2008 年和 2012 年标本 UU 检出结果见表 1.从实验结果看，2008 年 450 例和 2012 年 459 例患者的标本中，UU 的所有标本 UU 检出阳性率无差异性，P=0.18,P>0.05;2008 年 210 例和 2012 年 217 例男性标本 UU 的检出阳性率无显著性差异，P>0.05;2008 年 240 例和 2012 年 242 例女性标本 UU 的检出阳性率也无显著性差异，P>0.05.【表1】
2008 年 150 例阳性标本和 2012 年 134 例阳性标本中分离的 UU 分别对交沙霉素、强力霉素、氧氟沙星和阿奇霉素等 4种抗菌素的敏感情况：2008 年和 2012 年检出的 UU 对交沙霉素、强力霉素、氧氟沙星和阿奇霉素敏感率均有显著性差异，P<0.05.2008 年 46 例男性患者阳性标本和 2012 年 38 例男性患者的阳性标本中分离的 UU 分别对交沙霉素、强力霉素、氧氟沙星和阿奇霉素等 4 中抗菌素的敏感情况：交沙霉素和阿奇霉素敏感率有显著性差异，P<0.05;强力霉素和氧氟沙星敏感率无显著性差异，P>0.05.2008 年 104 例女性患者阳性标本和 2012 年 96 例女性患者的阳性标本中分离的 UU 分别对交沙霉素、强力霉素、氧氟沙星和阿奇霉素等 4 种抗菌素的敏感率有显著性差异，P<0.05.【表2-4】
3 讨论
药敏试验常用于指导解脲脲原体感染者的治疗，在临床中具有重要意义。自 1974 年 Ford 和 Smith 首次从 NGU 病人分离出耐四环素 UU 菌株之后，国内外关于解脲脲原体体外药物敏感性的文献报道已有很多，而且还发现支原体的耐药菌性呈现地域性差异和随时间呈动态变化。1974 年，Ford 和 Smith 首次报道部分从泌尿生殖道中分离出来的 UU 患者很难用四环素治愈，约 6%-10%对四环素耐药，使人们认识到支原体耐药菌株的存在，随后临床分离的支原体耐药菌株不断增多.
2000 年，有研究显示深圳地区 UU 耐药性最低依次为普那霉素、交沙霉素和强力霉素，贵阳地区依次为强力霉素、交沙霉素和普那霉素，北京地区依次为强力霉素、交沙霉素、阿奇霉素和米诺环素，济南地区依次为左氧氟沙星、交沙霉素和强力霉素，温州地区依次为交沙霉素、强力霉素和左氧氟沙星.这说明 UU 的对药物敏感性可能存在时间和地域的差异，因此，尽量不以其他地区的和以往的实验结果作为临床经验用药的指南。临床中有必要常规检测支原体对药物的敏感性，这样不仅可以预测抗菌药物的治疗结果，为临床提供药物选择的依据，指导临床医师合理应用抗生素；还有利于监测支原体耐药谱变迁情况，综合分析支原体感染情况和药敏结果、总结其规律和发展趋势，促进用药科学性.为了解上海地区支原体感染和耐药率，为临床用药提供参考，本研究统计了 909 例泌尿生殖道感染者的标本支原体培养及药敏结果，并试图阐述上海地区2008-2012 年解脲脲原体药敏总体趋势。
研究结果显示，通过对 2008 年 450 例和 2012 年 459 例患者的标本进行检测，UU 检出阳性率无差异性，P=0.18,P>0.05;男性标本和女性标本分别统计 UU 的检出阳性率也无显著性差异；说明 UU 的感染和携带率在 5 年间很可能无明显变化。
2008 年 150 例阳性标本和 2012 年 134 例阳性标本中分离的UU 分别对交沙霉素、强力霉素、氧氟沙星和阿奇霉素等 4 种抗菌素的敏感率有显著性差异，P<0.05.这说明总体上，UU 对这4 种药物敏感率都在降低，提示临床医师要根据药敏试验选用抗菌素。
2008 年 46 例和 2012 年 38 例男性患者的阳性标本中分离的 UU 分别对交沙霉素和阿奇霉素敏感率有显著性差异，P<0.05;强力霉素和氧氟沙星敏感率无显著性差异，P>0.05.说明男性患者的 UU 的耐药谱发生变化，对交沙霉素和阿奇霉素的敏感率越来越低，临床医师如单纯依靠临床经验进行治疗，可能会影响疗效。
2008 年 104 例和 2012 年 96 例女性患者的阳性标本中分离的 UU 分别对交沙霉素、强力霉素、氧氟沙星和阿奇霉素等 4中抗菌素的敏感率有显著性差异，P<0.05.这说明，女性患者的UU 药物敏感性越来越低。
已有的研究表明，UU 的药物敏感性和多种因素有关；不规范治疗是导致 UU 的敏感性发生变化的重要原因.女性患者由于生理结构不同等原因，导致女性感染 UU 后临床表现往往不典型，女性患者往往会自行服药或不规范治疗，导致女性患者检出的 UU 对药物敏感性发生变化.这种变化多是诱导 UU 的基因变化从而导致 UU 的药物敏感性产生变化。比如，亚治疗浓度氧氟沙星可以诱导 UU 的 TEM 基因发生变化从而导致 UU 对氧氟沙星的敏感性发生变化。学界将 UU 分为2 个生物群和 14 个血清型，目前有研究显示不同的血清型 / 生物群致病性可能不同，不同血清型 / 生物群的药物敏感性可能存在差异;上海在 2008 年和 2012 年间 UU 的耐药谱发生变化，是由于 UU 的基因发生变化还是由于感染的 UU 血清型发生变化，或者是由于其他因素，值得进一步探讨。
参 考 文 献（References）
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