血脂异常也常称作高脂血症,一般是指血中总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),甘油三醋(TG)超过正常范围及(或)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低下。目前公认调脂最有效并广泛应用的调脂药为他汀类药物,为了达到理想的调脂效果,联合应用其他调脂药物非常必要,但是联合贝特类、烟酸类等会增加毒副作用,严重者可导致横纹肌溶解症的发生。
中药治疗血脂异常因其疗效好、副作用小,已愈来愈受到国内外学者的广泛关注。中药复方调脂汤,内清外柔,化痰祛瘀,用于治疗血脂异常,已在临床上取得了较好的疗效。本实验通过动物实验观察中药调脂汤对血脂异常大鼠血清和组织血脂的治疗作用,为中药治疗血脂异常及相关疾病提供了新的思路及理论依据。
1 实验材料
1.1 实验动物SPF级的雄性大鼠采购自军事医学科学院。
1.2 调脂汤由吉林省中医学院制备:山楂、葛根、莱菔子各30g,水煎取汁300ml备用。
1.3 立普妥生产编号:1237325辉瑞制药有限公司生产。
1.4 高脂乳剂取1g丙硫氧嘧啶于乳钵中研细,备用,取猪油20g置于40度水浴加热融化,置于乳钵中,加入10g胆固醇、1g丙硫氧嘧啶,充分搅拌,溶解。
再徐徐加入10%去氧胆酸钠水溶液20ml,并不断搅拌,然后加入5ml吐温-80,研磨乳化均匀,最后加蒸馏水至100ml,密闭冰箱保存,使用时先于37度水浴中融化。
1.5 主要仪器OlympusCKX41倒置显微镜,LEICARm2245电动进样切片机。
2 实验方法及步骤
2.1 实验动物分组SPF级的雄性大鼠60只,随机分为6组:正常组、模型组、立普妥组、调脂汤小剂量组、中剂量组、大剂量组。除了空白组外,其余各组每天灌胃高脂乳剂(1ml/100g体重),7天后采眼眶血确定造模成功,开始实验组灌胃给药,治疗2周,各组动物最后一次灌胃后,禁食12小时,不禁水,此后取眼动脉血,分离血清处死大鼠,取出心脏、主动脉和肝脏。
2.2 检测指标及方法
2.2.1 血清脂质检测
总胆固醇:酶法。
高密度脂蛋白胆固醇:硫酸葡聚糖-镁法。
低密度脂蛋白胆固醇:十二烷基硫基硫酸钠双沉淀法。
甘油三酯:分溶抽提-乙酰丙酮显色法。
磷脂:硫酸亚铁还原法。
游离脂肪酸:一次抽提比色法。
2.2.2 组织脂质检测将肝脏充分捣碎,每100mg加入2ml氯仿-甲醇(1∶1)抽提液。抽提脂质24小时以上,测定抽提液中的脂质,胆固醇测定采用改良的单一试剂法,甘油三酯和磷脂测定同血清脂质检测方法。
2.2.3 病理检查整个主动脉用苏丹三染色。心脏和主动脉于10%甲醛中固定,石蜡包埋,切片,HE常规染色,观察动脉的脂质沉淀以及狭窄程度。
2.3 统计学分析测定结果采用均数加减标准差表示,数据应用SPSS11.5统计软件进行分析。
3 结果
3.1 血清脂质检测结果见表1
与正常对照组相比,高脂模型组、立普妥组、调脂汤小、中、大剂量组血脂各项指标比较P<0.05,血脂改变符合饮食性高脂血症特点。
结果显示,调脂汤大中剂量组及立普妥剂量组治疗后血清TC,TG,LDL-C降低,差异具有显著性意义(P<0.05),调脂汤大剂量组治疗后血清HDL-C显著升高(P<0.05)。
3.2 组织脂质检测结果
与正常对照组相比,高脂模型组、立普妥组、调脂汤小、中、大剂量组血脂各项指标比较P<0.05,血脂改变符合饮食性高脂血症特点。
结果显示,各组治疗后组织TC、TG降低,差异具有显著性意义(P<0.05),调脂汤小剂量组和调脂汤中剂量组具有相似的治疗效果,调脂汤高剂量组的治疗效果优于其他治疗组(P<0.05)。
3.3 病理检查结果大鼠治疗后,取主动脉弓作组织病理检测。肉眼观察,各主动脉弓未见明显异常。HE染色,镜下观察各例动物的组织病理改变,如表5所示,主动脉弓脂质沉淀范围较小,且只有轻度脂质沉淀,空白对照组、模型对照组和各剂量治疗组的主动脉弓未见病理改变。
4 结论
调脂汤大中剂量组及立普妥剂量组治疗后血清TC、TG、LDL-C降低,差异具有显著性意义(P<0.05),调脂汤大剂量组治疗后血清HDL-C显著升高(P<0.05),说明调脂汤可以起到对血脂的调节作用。
在对肝脏血脂的影响方面,调脂汤小剂量组和调脂汤中剂量组具有相似的治疗效果,调脂汤高剂量组的治疗效果优于其他治疗组(P<0.05)。说明调脂汤小、中、高剂量组均对肝脏血脂有一定的调节作用。
病理方面,调脂汤对于大鼠主动脉弓脂质沉淀范围较小,且只有轻度脂质沉淀,但主动脉弓未见病理改变。
参考文献
[1]郭建,高福云,李宏.大鼠高脂血症模型的改进方法[J].实验动物科学,2008,12(25):6.
[2]刘明,董超仁,苏静怡.一种简便实用的大鼠高脂血症模型[J].中国药理学通报,1989,(5)2:43.