牙釉质脱矿是口腔正畸治疗后医生和病人都比较关注的问题,据国内外研究报道,进行固定矫治的病人牙釉质脱矿的患病率为50%~80%,最近的调查研究显示其发病率更高达73%~95%,且无明显性别差异。众多学者对正畸矫治后釉质脱矿的预防和治疗进行了大量研究,但结果不甚一致。近年来多乐氟的推出引起了正畸医生的关注,因其使用方便而备受大家青睐,但多乐氟对脱矿釉质的再矿化效果如何鲜有报道。本研究在体外制备釉质脱矿模型,应用多乐氟对其进行再矿化处理,通过测量其显微硬度值并观察釉质表面形态结构来评估多乐氟对脱矿釉质的再矿化效果。
1、材料和方法
1.1离体牙选择
选取因正畸治疗而拔除的健康前磨牙75颗,要求无龋坏、无裂纹、非四环素牙、非氟斑牙、牙体牙髓未经任何治疗。用刮治器去除表面牙石和残留软组织,以慢速手机橡皮杯蘸取抛光膏(不含氟)对牙冠颊面抛光至肉眼下光洁,流动水冲净后储存于生理盐水中,置于4℃冰箱,备用。
1.2实验仪器及材料
1.2.1仪器显微硬度仪(HV-1000型,莱州华银试验仪器有限公司),数显恒温水浴箱(金坛市科析仪器有限公司),pH测定仪(雷磁PHS-3C型,上海精密科学仪器有限公司),磁力加热搅拌器(深圳市标乐实业有限公司)。
1.2.2材料酸蚀剂:
350g/L磷酸凝胶(德国);托槽:AO自锁托槽(美国);粘结剂:京津釉质粘结剂(天津,中国);人工唾液:采用ISO/TR1027标准人工唾液配方;人工脱矿液:采用部分饱和酸缓冲脱矿系统配制;多乐氟:氟浓度为50g/L,高露洁棕榄有限公司(德国);氟保护漆:氟浓度为1g/L,Ascent(美国)。
1.3模型制备和分组
1.3.1脱矿模型制备模拟口内托槽直接粘结方法:牙齿颊面酸蚀30s,水气冲洗、吹干后,用京津釉质粘结剂将托槽粘结在牙冠颊面中心位置,清除托槽周围多余的粘结剂。将样本浸泡于脱矿液中,在37℃恒温水浴箱中脱矿2周,每天更换脱矿液,2周后去除离体牙上的托槽及粘结剂,抛光备用。
1.3.2实验分组及处理将75颗离体牙随机分为5组,每组15颗牙,A组不作任何处理;B组脱矿处理;C组脱矿后浸泡在人工唾液中进行再矿化;D组脱矿后浸泡在人工唾液中,牙齿颊面涂布氟保护漆,方法:清洁干燥牙面,用棉棒蘸取适量氟保护漆均匀涂布在牙齿颊面牙面上,轻轻吹干,在牙面上会形成一层不透明的薄膜,1min后将其放回人工唾液中;E组脱矿后浸泡在人工唾液中,牙齿颊面涂布多乐氟,多乐氟的使用方法同氟保护漆,涂布多乐氟后牙面上会形成一层微黄色的涂膜,1min后将其放回人工唾液中。
1.4研究方法
1.4.1体外pH循环将C组、D组和E组的样本每天浸泡在人工脱矿液中1h,然后用去离子水彻底冲洗(一般冲洗3次),其余时间置于人工唾液中,上述过程均在37 ℃的恒温水浴箱中进行。人工唾液和人工脱矿液每日更换,循环20d。
1.4.2显微硬度值测定使用显微硬度仪,载荷50g,保荷15s,测量所有样本釉质表面的显微硬度值,在牙齿颊面托槽粘结部位的龈向、颌向、近中或远中向各选择1个点共3个点进行测量后取平均值。所有测量均由同一测量员完成。
1.4.3釉质表面形态结构观察从各组中挑选样本制作牙釉质块,超声震荡清洗后固定在载玻片上行真空干燥和离子溅射喷金,扫描电镜下观察釉质表面形态结构。
1.5统计学处理采用SPSS 17.0及PPMS 1.5统计学软件对数据进行分析,多组数据间比较采用单因素方差分析方法,两两比较采用LSD-t法,以P<0.05为差异有显著性。
2、结果
2.1各组显微硬度值比较
A组、B组、C组、D组、E组样本釉质的显微硬度值分别为400.06±15.05、123.05±8.15、148.20±15.77、211.43±16.04、216.72±17.31。A组的显微硬度值最高,B组的显微硬度值最低,D组和E组的显微硬度值均高于C组,差异均有统计学意义(F=803.22,P<0.05),D组和E组的显微硬度值差异无显著性(P>0.05)。
2.2各组釉质表面形态结构比较
扫描电镜观察显示,A组釉质表面平坦,釉柱形态规则,边缘清晰,分布均匀,未见明显的孔隙(图1A);B组釉质表面极为粗糙,釉柱溶解,形态不规则,呈蜂窝状,视野中遍布微小孔隙,局部可见深坑状凹陷(图1B);C组釉质表面较粗糙,仍可见较多微小孔隙,但在溶解釉柱和微小孔隙内可见斑片状物沉积,深坑状凹陷较少见(图1C);D组釉质表面较平坦,可见较多颗粒状沉积物堆积在溶解釉柱表面,孔隙较为少见,无明显深坑状凹陷(图1D);E组釉质表面较平坦,釉柱表面大量致密颗粒球状物沉积,孔隙较少见,无明显深坑状凹陷(图1E)。
3、讨论
正畸治疗结束拆除口内固定矫治器后,牙面上出现一些白垩色的斑块,尤其是上前牙区。这些白垩色斑块是牙釉质早期脱矿的表现,不仅影响牙齿的美观,严重者可能发展成龋损。固定矫治时需要在牙面上粘结托槽,影响口腔内菌群的组成、唾液的分泌和口腔卫生的维护等,这些均是造成牙釉质脱矿的直接或间接因素。本实验中的样本脱矿2周后,其牙面上均形成肉眼可见的白垩色斑块。
釉质的再矿化是指钙、磷和其他矿物离子沉积于正常或部分脱矿的釉质中或釉面的过程。有研究表明,釉质显微硬度与其矿物质的含量呈正相关,故釉质表面显微硬度常用来反映釉质的矿化程度。众多的研究结果从各方面证实氟化物能促进釉质再矿化,不同氟浓度对釉质的再矿化效果不一。
目前的含氟产品种类较多,其含氟浓度、使用频次、病人配合度和再矿化效果等问题均影响到含氟产品在临床上的推广使用。本实验在人工唾液的基础上采用多乐氟和氟保护漆对脱矿釉质进行再矿化处理,评估多乐氟的再矿化效果。结果显示,正常釉质表面的矿物质含量较高,正常釉质硬度高于脱矿釉质,这与WILSON等的研究结论一致;经脱矿处理后釉柱溶解,釉质表面的矿物质含量显著下降,导致显微硬度值降低,而经过再矿化处理后,釉质表面出现矿物质沉积,使其显微硬度值得到不同程度升高。这一方面说明了人工唾液具有使脱矿釉质再矿化的能力,与吴国涛的相关研究结果一致;另一方面也说明了含氟产品的使用明显促进了脱矿釉质的再矿化,且再矿化效果要明显优于单纯人工唾液。
本文D组和E组的显微硬度值差异无显著性,说明短时间内多乐氟和氟保护漆对脱矿釉质的再矿化能力相当,这可能归因于早期两者的再矿化途径相似,尽管两种制剂氟浓度相差较大,但两者在短期内均能使脱矿釉质周围的氟离子达到较高浓度,满足釉质再矿化所需,而且釉质的再矿化效果除与含氟浓度相关外,还受其他因素的影响,对于两种氟制剂的长期再矿化效果是否有差异则需进一步研究。本文D组和E组的样本经过20d的再矿化后釉质表面的显微硬度仍明显低于脱矿前,说明在短时间内对脱矿釉质进行氟化处理不能使其恢复至脱矿前正常釉质的矿化程度。对于多乐氟能否使脱矿釉质的显微硬度值完全恢复至脱矿前水平以及所需时间尚无定论,并且多乐氟促使脱矿釉质再矿化的最佳使用周期也有待进一步探讨。本文扫描电镜结果也支持以上结论。
国外多项临床研究证实多乐氟能降低龋病的发生率,DEMITO等研究显示,在粘结托槽后使用多乐氟能明显减少托槽周围釉质脱矿的面积和深度。国内相关临床研究也显示,多乐氟能降低釉质脱矿。综上所述,多乐氟作为一种再矿化制剂可以应用于正畸矫治后釉质脱矿的再矿化,但与其他氟制剂(如1g/L氟保护漆)相比其优势并不明显,而其长期效果则有待进一步研究。