藻肤康抗菌剂是一种含有机高分子聚合物和无机矿物质的精制硅藻土功能性医辅新材料,其有机质具有高粘附性和成膜作用,可以堵塞细菌病毒的呼吸通道,通过有机成分对细菌进行溶解脂质、改变细菌细胞膜的通透性,使菌体内的代谢发生障碍而起到杀菌的作用[1]; 经特殊处理的藻肤康抗菌剂其硅藻土的无机矿物质具有独特的微观结构,晶格孔隙高,对液体的吸附能力极强,将菌液吸附到孔隙内,使细菌细胞质高度浓缩脱水,有效地阻止细菌等病原微生物的生长代谢[2].有机和无机质双向作用,达到杀菌的目的。藻肤康抗菌剂杀菌机理结合了有机生物源性抗菌活性物质与无机矿物源性抗菌材料的优点,集抗菌消毒、吸附净化功能于一体,在医药卫生等领域具有十分广泛的应用价值[3 -9].本研究检测了藻肤康抗菌剂的实验室杀菌效果、稳定性和现场杀菌效果,结果报告如下。
1 材料与方法
1. 1 藻肤康抗菌剂的制备 实验样品为藻肤康抗菌剂,由青岛泉佳美硅藻泥科技有限公司提供。对照样品为不含藻肤康抗菌剂成分的同质材料。
1. 2 振荡烧瓶试验 ( 定量杀菌试验)[10]
1. 2. 1 菌悬液的制备 实验菌为金黄色葡萄球菌( ATCC6538) 、大肠埃希菌 ( 8099) 、白色念珠菌( ATCC10231) .24 h 新鲜斜面培养物用稀释液洗下并稀释配制成菌悬液,与 3% 小牛血清白蛋白溶液作对倍稀释,制成试验浓度菌悬液,使菌液浓度为 107 ~108 cfu / ml 备用。
1. 2. 2 振荡烧瓶试验 称取藻肤康抗菌剂 10 g 放入250 ml 的三角烧瓶中,分别加入 5 ml 菌悬液和 95 mlPBS,将三角烧瓶固定于振荡摇床上,在作用温度为20 ℃ ~ 25 ℃ 的条件下以 300 r / min 振摇 2 min,用PBS 作适当稀释后作为实验组震荡前样液。再分别振摇 5 min、10 min、20 min,在 3 个时间段各取 0. 5 ml振摇后的样液,用 PBS 做适当稀释后作为实验组振荡后样液。分别吸取振荡前和振荡后样液,以琼脂倾注法接种平皿,每个样液接种两个平皿,进行活菌培养计数。同时设阴性对照组和不加样品组。对照样品组除以不含抗菌剂的材质相同样品 10 g 代替抗菌剂样品外,其它操作程序均与实验组相同。
不加样品组分别取 5 ml 菌悬液和 95 ml PBS 加入250 ml 三角烧瓶中,混匀,分别于振荡前和振荡后 1h 各取 1. 0 ml 菌悬液与 PBS 的混合液做适当稀释,进行活菌培养计数。不加样品组活菌计数在 1 × 107 ~ 9× 108 cfu / ml 之间,且样品振荡前后平均菌落数差值在 10%以内,实验有效。
1. 2. 3 杀菌率 ( % ) 计算方法 杀菌率 ( % ) =( 样本振荡前平均菌落数 - 样本振荡后平均菌落数) /样本振荡前平均菌落数 ×100%.
1. 3 稳定性试验 对藻肤康抗菌剂杀菌稳定性的检测,取包装好的藻肤康抗菌剂,置 37 ℃恒温箱内 90d.于放置前后分别取样检测对金黄色葡萄球菌的杀菌效果。该试验的作用时间、分组及其他条件均与原振荡烧瓶法定量杀菌试验相同。按照 1. 2. 3 所述杀菌率计算方法,分别测定存放前后藻肤康抗菌剂对金黄色葡萄球菌的杀菌效果,储存后藻肤康抗菌剂增加10% 的浓度,对微生物的杀灭效果仍能达到消毒的要求,可判为通过。
1. 4 现场杀菌试验 随机选择 30 名志愿者,杀菌前用无菌棉拭沾湿采样液分别在手指、前臂皮肤部位按规定面积作涂抹采样,再将采样棉拭分别投入采样管内,作为阳性对照。然后对另一侧皮肤用棉拭沾湿作擦拭杀菌并作用1. 0 min ( 前臂皮肤擦拭杀菌作用3. 0min) .用无菌棉拭沾湿含中和剂的采样液按上述方法作涂抹采样,将采样棉拭采样端剪入含中和剂的采样液试管中,作为杀菌后实验组。将各组采样管经充分振荡后洗脱,取洗脱液作活菌计数,计算自然菌减少率。
2 结 果
2. 1 振荡烧瓶试验 经检测,藻肤康抗菌剂对 3 种实验菌种的5 min 平均杀菌率均为99.99% ( 见表1) .
2. 2 稳定性试验 藻肤康抗菌剂存放前后,作用 5min、10 min、20 min 对金黄色葡萄球菌的平均杀菌率分别为 99. 99%、99. 999%、99. 999%,说明藻肤康抗菌剂置37 ℃恒温箱内90 d 后杀菌效果不受影响,具有良好的稳定性 ( 见表 2) .
2. 3 现场杀菌试验 手和皮肤分别经过 30 人次试验证明,用该藻肤康抗菌剂对手擦拭消毒作用 1. 0 min,对前臂皮肤擦拭消毒作用 3. 0 min,可消除皮肤上自然菌达到 90%以上。
3 讨 论
结果显示,藻肤康抗菌剂仅需 5 min 就可对 3 种实验菌种的杀菌率高达 99. 99%,因此可以看出藻肤康抗菌剂具有广谱杀菌性,对一般细菌繁殖体和真菌均有良好的杀菌效果。且藻肤康抗菌剂在 37 ℃ 恒温箱内放置 90 d 后其 5 min 杀菌效果仍高达 99. 99%,具有较强的杀菌稳定性。另外,藻肤康抗菌剂在现场试验中可消除皮肤上的自然菌高达到 90%以上,由此可见其双机抗菌物质[11 -12]具有坚实的杀菌稳定性及高效性。
参 考 文 献
[1] 刘景华,吕晓丽,张奶玲 . 硅藻土微波改性及对污水中硫化物吸附的研究 [J] . 非金属矿,2006,29 ( 3) : 36 -37.
[2] 沈岩柏,朱一民,魏德洲 . 硅藻土对诺卡氏菌的吸附作用 [J] .东北大学学报: 自然科学版,2005,26 ( 2) : 183 -185.
[3] 王洪林,权力敏 . 高分子生物抗菌胶膜的研制及抗菌效果与性能的检测 [J] . 预防医学论坛,2008,14 ( 8) : 735 -738.
[4] 张文福 . 更安全更友好的消毒剂 [J] 中国消毒学杂志,2013,30 ( 5) : 397 - 401.
[5] 刘艳丽,黄先威,庞丽,等 . 聚乙烯吡啶季铵盐的制备及抗菌性能 [J] . 湖南工程学院学报,2013,23 ( 2) : 57 -59.
[6] 郭秀瑞,任建梅,李宝智 . 硅藻土作为抗菌剂载体的研究 [J] .中国非金属矿工业导刊,2002,23 ( 2) : 20.
[7] 胡粉娥,陈吉书,汪帆,等 . 载银硅藻土抗菌材料的制备及其抗菌性能研究 [J] . 化工新型材料,2011,39 ( 8) : 57 -59.
[8] 林新兴,刘凯,陈礼辉,等 . 改性硅藻土吸附壳聚糖 - 胍盐微球及其在抗菌纸中的应用 [J] . 中国造纸学报,2014,29 ( 1) : 16- 20.