分离培养法是国内食品沙门菌检测的常用方法，其操作流程繁琐，且需耗费大量的时间。同时，针对免疫学方法，其敏感度不高，针对聚合酶连反应法，其需特殊仪器和设备，导致检测受到限制[1]。环介导等温扩增技术，即LAMP,其属于新型等温核酸扩增方法，操作方式简单、敏感度高等是其主要优点〔2〕。因此，为研究LAMP在食品卫生沙门菌检验中的应用价值，本研究以84件食品样本为对象，采用2种不同的检测方法，取得了一定成效，现将相关报道如下。
1 一般资料与方法
1.1一般资料
选取2015年3~12月收集的食品样本84件，其中，包括20件生鲜肉、巧件熟肉制品、18件生水产品、17件非发酵豆制品、4件冷冻生肉、4件生食类蔬菜和6件鲜榨果汁。以肠炎沙门菌为参考菌株。
1.2方法
1.2.1食品样本前增菌以《食品微生物学检验沙门氏菌检验》为依据，分别选取25g食品标本，将其添加至225mlBPw无菌质袋内，利用拍击式均质器，进行1~2min的拍打，基于37°c下，8~18h为培养时间。针对冷冻产品，应以低于45°C为基础条件，解冻时间不得超过15min.
1.2.2
LAMP检测方法分别取食品标本前增菌液lml,基于10000r/min指标下，进行2min的离心，除去上清液后，借助核酸通用提取试剂盒，提取核酸。与此同时，取μl上清液，用于制作待检模板DNA.以食品微生物学检验沙门氏菌检验冲指导，设计引物，并检测食品标本增菌液DNA,且以标准的反应体系为指标。以65°C为条件，进行60min的水浴，基于80°C灭活酶前提下，促使反应体系得以终止。待结束反应后，通过肉眼检测，若表现出混浊现象，则为阳性，若不存在混浊现象，则为阴性。
1.2.3分离培养鉴定基于《食品微生物学检验沙门氏菌检验》指导下，在轻轻晃动经培养过的食品标本前增菌液后，以1ml为标准，将其放置于10mlTTB增菌液中，以42°C为标准，18~24h为培养时间。同时，取1ml放置于10mlSC增菌液中，以37°C为标准，18~24h为培养时间。分别取1环食品标准增菌液，并放置于Bs平板和xLD平板上，以37°C为标准，18~24h为培养时间。选取可疑菌落3个，分别接种于TSI、赖氨酸脱梭酶试验培养基以及营养琼脂平板上，以37°c为标准，18~24h为培养时间。经由生化反应，与沙门菌特征初步吻合，基于营养琼脂平板获取可疑菌落，利用生理盐水，制作浊度适当菌悬液，借助全自动微生物鉴定系统，实施分析。若条件需要，可开展血清学分型。
1.3统计学分析
利用sPss20.0软件对本次研究所有数据进行分析，x2检验用于检验计数资料的比较，差异具有统计学意义用P<0.05表示。
2 结果
对比食品标本检验结果，LAMP检测阳性率为10.7%,高于分离培养法的4.8%,差异具有统计学意义（P<0.05），如表1所示。
3 讨论
LAMP检测法，即环介导等温扩增法，属于新型核酸扩增方法，其将4种特异引物设置于靶基因的6个区域内，基于链置换DNA聚合酶的作用下，以65°c为恒温条件，达到扩增目的[3].针对该种检测方法，操作方便、特异性强均属于该其基本特点，在扩增产物的前提下，降低样品检测难度，在检测食品微生物中应用价值较高[4].针对检测结果，可通过肉眼，观察是否存在白色混浊沉淀物，以达到判定扩增情况的目的[5].
本次研究，在对食品样本中的沙门菌属检验过程中，分别采用分离培养法和LAMP检测法进行检测。针对分离培养法，其以《食品微生物学检验沙门氏菌检验》为指导，按照一定的步骤进行检测，即前增菌、增菌、分离、筛选可疑菌落、生化等步骤[6].一般情况下，得到阴性检测结果需4d左右，而得到沙门菌检测结果需7d左右。与此同时，该检测方法过程十分繁琐、复杂，需借助全自动微生物鉴定系统，存在血清分型效价不高的问题，而试剂不仅昂贵，且容易出现失效状况[7].相较于需两次增菌分离培养的分离培养方法，LAMP检测法在提取前增菌液核酸的基础上，方可开展扩增实验，完成扩增过程仅仅需要lh,促使检验流程得以简化，而得到食品样本沙门菌属检验结果仅需要24h,大大缩减了检测时间。针对LAMP检测法，检测人员可利用肉眼，对检测结果进行直接判定，促使其更加直观、形象[8].
本次研究以84件食品样本为对象，分别通过分离培养法和LAMP检测法进行检测。结果显示，LAMP法的检测阳性率为10.7%,分离培养法的检测阳性率为4.8%.可见，LAMP法在检测食品卫生沙门菌属的应用价值更高。
综上所述，在食品卫生检验中，针对沙门菌属，通过LAMP法进行检测，准确率更高。
参考文献
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