摘要:流式细胞术是借助于流式细胞仪对快速直线运动中的单列细胞以及生物颗粒进行快速筛选或者定量分析的综合性检测技术。目前随着流式细胞术发展的不断成熟,其已经在临床医学检测中得到了广泛应用,比较典型的包括免疫学领域、微生物检测领域、肿瘤疾病诊断领域以及血液疾病诊断领域等。流式细胞术的出现为医学检验提供了全新的医学视角,因此近些年受到人们越来越多的关注,很多专家学者关于流式细胞术的医学检验开展了大量的理论和实践工作。本文将近些年关于流式细胞术应用于医学检验的研究进展进行综述。
关键词:流式细胞术,医学检验,研究进展
流式细胞术是近些年发展起来的一种新型医学检测技术,其综合了细胞生物学、技术以及物理学技术等多种技术,是一种综合性检测技术[1,2]。其主要是在细胞快速流动条件下对细胞或者细胞内的生物粒子进行检测[3]。目前流式细胞术在生物细胞学、肿瘤学以及遗传学中得到了广泛应用,其中在医学检验中的应用最为广泛。
1. 流式细胞术在免疫学中的应用
在临床检测中将机体免疫系统是否处于正常工作状态作为评价被检测者是否患病的主要指标之一[4]。随着流式细胞术的不断发展,其在机体免疫状态检测中的应用越来越广泛。采用流式细胞术可以对B细胞和T细胞进行有效检测。通常将B细胞以及T细胞作为评价机体免疫状态的主要指标,其中T细胞又可以进一步细分为抑制性T细胞和辅助性T细胞,辅助性T细胞是T细胞中表面分化抗原簇标记为CD4+的一种亚群,抑制性T细胞为CD8+[5]。此外,还可以通过对T细胞和B细胞的比例以及自然杀伤细胞等进行测量来对机体的免疫状态进行监测,并且将其作为临床疾病诊疗的关键依据[6]。细胞免疫功能通常会受到机体生理以及病理状态等多种因素的影响,因此在检测中应该结合临床作出准确判断。现代医学研究表明细胞免疫参数异常与获得性免疫缺陷疾病之间具有密切的关系,比如当淋巴细胞CD4与CD8的比值下降,同时淋巴细胞CD4绝对值下降,表明患者很可能为获得性免疫缺乏综合征,但是也有其他疾病的可能,需要进行进一步的诊断;此外系统性红斑狼疮患者的淋巴水平与病情严重程度以及累积器官程度之间具有密切的关系,系统性红斑狼疮合并严重肾脏损害时CD4水平降低,而CD8水平会相应升高[7]。
2. 流式细胞术在微生物检测中的应用
微生物检测在药品以及食品领域具有重要的作用,人们对微生物检测的关注程度越来越高。流式细胞术具有高效、灵敏的特点,同时可以开展多参数分析,因此在微生物检测中得到了广泛应用。借助抗体荧光标记技术,流式细胞术不仅可以对血清抗体、病原菌以及病毒等进行检测,还可以在抗生素敏感性试验中进行应用[8]。同时流式细胞术通过对细胞表面单克隆抗体进行特异性识别,可以对受感染细胞进行定量检测[9]。除此之外,流式细胞术还可以对病毒、真菌、寄生虫混合感染情况进行有效检测。在体外抗生素的药物敏感性试验中,流式细胞术基于被荧光标记的抗体在于病原体结合之后会产生不同强度的荧光,可以对病原体的活性以及功能进行有效反映,进而有效判断病原体对抗生素的抗性[10]。
3. 流式细胞术在肿瘤诊断中的应用
通过精确测量DNA含量,流式细胞术可以对部分癌前病变的性质以及发展趋势进行有效评价,有助于在肿瘤疾病诊断中对恶性肿瘤尽早诊断,进而为患者后续的治疗提供指导和依据[11]。通常情况下,DNA含量的异常增高提示很可能为恶性肿瘤疾病,相关研究表明骨髓瘤患者中癌细胞DNA异常增高的占比为76%,淋巴瘤患者中癌细胞DNA异常增高的占比为53%,白血病患者中癌细胞DNA异常增高的占比为23%[12]。此外肿瘤细胞的DNA倍体分析有助于肿瘤疾病患者预后的评估,一般来说二倍体肿瘤细胞患者预后结果较好,非整倍体肿瘤细胞患者预后较差,容易发生肿瘤细胞转移、复发以及死亡等[13]。除此之外,流式细胞术还可以基于化疗过程中DNA分布直方图变化情况有效评估患者的治疗效果,为治疗方案的调整提供依据。
4. 流式细胞术在血液疾病诊断中的应用
流式细胞仪可以对悬浮在血液中的血细胞进行筛选分析,而血液采集是临床疾病诊断的常用辅助手段,这位流式细胞术在血液疾病中的诊断以及推广奠定了基础。不同的抗血细胞表面分化抗原的单克隆抗体,因此流式细胞术可以采用不同的染料对同一个血细胞的不同参数进行检测,其在白血病分类诊断中的准确率超过90%[14]。基于白血病细胞表达种系抗原的不同可以将白血病分为五种类型,分别为T细胞系、B细胞系、红细胞系、髓细胞系以及巨核细胞系。基于白血病细胞的CD34和HLA-DR非特异性标志,还可以对白血病进行分类和分期。因此通过流式细胞室对白血病患者细胞周期以及DNA倍体进行测量,可以指导对患者的化学药物治疗,同时还可以通过流式细胞术对白血病细胞增殖情况进行监测,有效指导药物治疗,提高治疗效果[15]。除此之外,流式细胞术还可以对血小板膜糖蛋白用单抗免疫荧光进行标记,通过对血小板功能以及活化情况进行监测来评价其活化程度在血栓性疾病进展中的作用。
结束语
基于以上分析,流式细胞术已经在医学监测的多个领域广泛应用,并且取得了较好的效果。但是相对来说流式细胞术也存在一定的不足,比如其只能对细胞悬液中的单个细胞进行分析、对红细胞的测量误差较大等。不过相信随着今后技术的不断发展,流式细胞术将会在医学检测中发挥更大的作用。
参考文献
[1]王师, 张孟源, 童能胜.流式细胞术在临床检验中的应用[J].检验医学与临床, 2017, 14 (6) :897-898.
[2]盛慧明, 孙寒晓.流式细胞术的发展与展望[J].中华检验医学杂志, 2018, 41 (1) :20-23.
[3]汪洪涛, 唐洁, 姚春艳.《流式细胞术》课程分层次教学探索与实践[J].蚌埠医学院学报, 2018, 43 (7) :136-138.
[4]王卉, 王爱先, 甄军毅, 等.流式细胞术在成熟淋巴细胞肿瘤诊断中的应用[J].中华临床实验室管理电子杂志, 2017, 5 (2) :81-88.