环境中的尘螨是过敏性疾病产生的重要致敏原.过敏和临床免疫学会( AAAAI) 和世界卫生组织( WHO) 的数据显示: 环境中尘螨浓度超过 50 个尘螨/克尘可诱发过敏和哮喘,尘螨浓度超过 100 个尘螨/克尘,有极高的哮喘急性发作的危险[1].世界卫生组织( WHO) 过敏疾病治疗规范指出,过敏原暴露的避免是规范药物治疗的基础.在尘螨环境控制的基础上,进行规范的药物和/或脱敏治疗,才能充分保证过敏疾病的诊疗效果.尘螨环境控制的前提是尘螨浓度的检测.本文将不同的环境尘螨检测方法在实际生活环境中进行对照研究,以期发现优选的检测环境尘螨过敏原水平的方法.
1 材料与方法
1. 1 材料 随机选择海口某寄宿学校的学生寝室60 间.每间房间有上下铺 4 组,8 个床位.寝室均为水泥光板地面,无窗帘.选择临窗和临门两个铺位的全套寝具作为采样对象,所有采样对象均为在用状态下的寝具.
1. 2 方法
1. 2. 1 尘样采集 以相同吸尘器( 1 200 W) ,配备尘螨采集器,对所有寝室进行尘样采集.尘螨采集器头端紧密贴覆寝具表面,被褥、床垫均选择中央位置,抽吸 1 m2的范围,每次吸尘 2 min,枕头的双面均按顺序采取叠压式吸尘,每次吸尘 2 min.
1. 2. 2 尘样保管 标本置于统一的自封袋内,密封后记录相关信息,冷藏备检.若尘样标本内有大量大颗粒、絮状、丝状物存在,经 45 目滤器过滤后用于检测.
1. 2. 3 尘样检验 ( 1) 尘螨数量显微镜检 - 酒精固定和过饱和生理盐水方法分离尘螨: 取 0. 1 g 均匀稀松的细尘放入试管,将 75% 酒精倒入试管,振荡摇匀后,静置过夜.第 2 天,倒出上清.再向沉淀的尘样中倒入过饱和盐水浸泡,用玻璃棒悬起尘样标本,静置 15 min 后,用吸管吸取上清部分约 5 ml.
将 5 ml 上清移入用 1∶ 5墨汁染过的滤纸过滤,再取少量过饱和盐水冲洗后,将滤纸平置于体式显微镜下观察.结果判定: 10 倍视野内每发现一个螨虫或半个以上碎片,计数为一个螨虫,将计数 × 10 即为最终结果( 个尘螨/克尘) .( 2) ACAREX 尘螨过敏原化学快检: 取 0. 1 g 均匀稀松的细尘,按尘螨过敏原快速检测试剂盒( 产地德国) 的操作说明进行.
与标准色卡进行比对后,将结果分为 0 ~ 3 级,即 0= 阴性,1 = 弱阳性,2 = 阳性,3 = 强阳性.( 3) HH尘螨过敏原化学快检: 取 0. 1 g 均匀稀松的细尘,按尘螨过敏原快速检测试剂盒( 产地中国) 的操作说明进行.与标准色卡进行比对后,将结果分为 0 ~3级,即 0 = 阴性,1 = 弱阳性,2 = 阳性,3 = 强阳性.
1. 4 统计 学 方 法 使用 SPSS 19,以化学快检acarex 为自变量,以显微镜检数据为因变量,进行均值比较.3 种尘螨监测方法检测的数据之间进行双变量 Spearman 's 双侧检验分析,置信度选择为0. 01.
2 结果
2. 1 尘螨显微镜检定量数据与尘螨化学快检分级数据的对应关系 以显微镜检的定量数据为基础,对化学快检方法所获得的尘螨过敏原半定量分级数据进行比较发现,化学快检的阴性、弱阳性、阳性、强阳性半定量分级数据与显微镜检的定量检测数据均值有明显的梯度关系.如环境中尘螨平均为 38 个/克尘时,化学快检结果为阴性,平均为 68 个/克尘时,化学快检结果为弱阳性; 平均为 94 个/克尘时,化学快检为阳性; 平均为 136 个/克尘时,化学快检为强阳性.所有的检测寝室经显微镜检,均查出尘螨,但化学分级检测中有7 个为阴性结果,在所有检测寝室中占比为11.67%,阳性寝室占比为 88.33%.可见集体寝室中尘螨分布的普遍性.尘螨显微镜检定量数据与尘螨化学快检分级数据的对应关系和图解( 表 1,图 1) .
2. 2 尘螨显微镜检数据与尘螨化学快检分级数据的相关关系 所有入选寝室的尘样,经过化学快检ACAREX 和显微镜检后,进行 spearman's 相关性分析,化学快检 ACAREX 和显微镜检结果的相关性很好,r =0. 952,P <0. 01,结果( 表 2) .
2. 3 化学快检 ACAREX 和化学快检 HH 检测结果的相关关系 所有入选寝室的尘样,经过化学快检ACAREX 和化学快检 HH 检测后,对实验结果进行spearman's 相关性分析,化学快检 ACAREX 和化学快检 HH 检测结果的相关性很好,r =0.962,P <0.01,结果( 表3) .
3 讨论
国外大量研究[2 -7]显示: 尘螨致敏原主要来自尘螨粪便和尸体碎片,是引发过敏的重要致敏原,70%以上的过敏性鼻炎对尘螨过敏.居室、教室、办公室、宿舍等密切生活环境中尘螨过敏原检出率很高[8 -10],居民卧室螨检阳性率高达 76.7%,很多家庭寝具中检测到致敏水平的尘螨过敏原[11,12],而每克尘中尘螨超过100 个尘螨/ 克尘时即可诱发儿童哮喘,小于 50 个尘螨/克尘时则较安全.对于儿童和青少年,教室、卧室也成为过敏的积聚地[13,14].通过对密切生活环境的干预,可明显降低过敏原水平[15 -18].加强针对密切生活环境的过敏原防护,可以减少过敏发作[19,20].尽管完全规避过敏原只是理想状态,现实可行的方法是尽可能降低密切生活环境中的过敏原,使其降低到引发过敏的阈值之下.
环境尘螨过敏原监测方法是评价过敏原防护效果的基础[21 -23],反映环境中尘螨过敏原的方法很多,如显微镜检尘螨计数法、免疫学检测法、化学快检鸟嘌呤法.其中,最直接的检测方法就是显微镜计数方法,免疫学检测方法可特异性鉴别不同的螨过敏原,化学快检方法则通过检测鸟嘌呤 -螨粪便的重要成分来间接反映尘螨数量.建立便捷高效的环境过敏原检测技术,对于防控过敏有重要意义,如监测环境过敏原水平的变化,才能了解过敏防护的效果.化学快检方法因其快捷和操作的优势,大大促进了室内尘螨污染程度监测的应用[1].本研究的结果显示: 化学快检试剂与传统显微镜检方法的相关性很好,又因为尘螨生存区域的局限性,化学快检方法完全可用于反映卧室环境中尘螨过敏原的水平和尘螨孳生程度.另外,国产试剂与进口试剂的化学快速尘螨检测方法几乎没有区别,说明国产的试剂同样可以达到标准的环境过敏原水平检测要求.在此次研究中发现,绝大多数集体宿舍中尘螨过敏原超过致敏水平,在所有检测寝室中,尘螨过敏原浓度阳性寝室占比为88.33%,可见生活环境中尘螨分布的普遍性.对于过敏人群来说,明确引发自身过敏的环境过敏原后,若能了解环境过敏原的水平,并进行相应的环境过敏原规避和治理等过敏防护措施[24 -26],必将大大减少过敏人群的病痛.本研究结果为相关管理部门制定过敏防护策略、国家标准及公众采取预防措施等提供了依据.
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