大马士革玫瑰 （Rosa damascene Mill.var.kazanlika）为蔷薇科蔷薇属灌木，花香纯正，是萃取玫瑰精油和加工玫瑰纯露的优良品种。玫瑰精油含有多种化学成分（如香茅醇、香叶醇等芳香物质、有机酸等有益美容的物质）[1],被认为是玫瑰精油的极品。大马士革玫瑰目前主要以分根、扦插、压条及组培繁殖[2].用压条、嫁接等方法繁殖，受季节、母株材料等多种因素限制，成活率极低，很难进行规模化生产；采用离体培养繁殖，在较短时间内可获得大量、整齐一致的种苗。黄颖等[3]以大马士革玫瑰茎尖为外植体进行组培快繁技术研究，筛选出最佳的初代培养基、继代培养基和生根培养基。吴新海等[4]研究了不同激素配比对大马士革玫瑰茎段继代增殖和生根培养的影 响 , 继 代 增 殖 培 养 以 MS +6 -BA1.0mg/L +NAA0.1mg/L+GA30.1mg/L+蔗糖 3%+琼脂 0.6%为宜；生根培养以 1/2MS+IBA0.5mg/L+蔗糖 3%+琼脂 0.6%为宜。赵蓓蓓等[5]
对大马士革玫瑰组培快繁体系进行了初步研究，指出继代增殖培养以1/2MS +6 -BA1.0mg/L +NAA0.04mg/L +IBA0.1mg/L较好，增殖系数为 2.4,最佳增殖培养基和生根培养基仍需继续探索。本研究在前人研究成果基础上，初代培养以 MS 培养基为基本培养基，增殖和生根培养以 WPM 培养基为基本培养基，以大马士革玫瑰带腋芽的茎段为外植体，探讨不同浓度组合的植物生长调节剂对不定芽诱导、增殖和生根的影响，以期为大马士革玫瑰的快速繁殖及商业化生产奠定基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
大马士革玫瑰采自石家庄圣地玫瑰公司，以生长健壮、无病虫害的当年生半木质化的嫩枝为试验材料。
1.2 培养条件
初代培养以 MS 培养基为基本培养基；继代增殖和生根培养以 WPM 培养基为基本培养基，添加不同浓度组合的植物生长调节剂，培养基中均加入 0.60%的琼脂、蔗糖 30.0g/L,pH5.6~5.8.培养温度 22~28℃，空气相对湿度 40%~60%,光照强度为 1500~2000Lux,光照时间为 14h/d.
1.3 试验方法
1.3.1 外植体处理
（1）消毒时间对外植体影响试验。在 3 月下旬至 4 月上旬，取当年生半木质化带腋芽的茎段，用自来水和软毛刷洗刷干净，在超净工作台上用 75%的乙醇消毒 30s,再用0.1%HgCl2溶液浸泡处理，浸泡时间分别为4.0、4.5、5.0,5.5,6.0、6.5min,最后用无菌水冲洗 5~6 次后接种于 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L 培养基上。每个处理接种 60 瓶，每瓶 1 个外植体，接种 30d 统计污染率、死亡率及成活率。
（2） 采样时期对外植体影响试验。分别于 1月（温室栽培）、3~4 月（大田栽培）和 7~8 月份（大田栽培）采集带腋芽的茎段，用自来水和软毛刷洗刷干净，在超净工作台上用 75%的乙醇消毒30s,再用 HgCl2消毒 5min,最后用无菌水冲洗 5~6 次后接种于培养基上。每个处理接种 60 瓶，每瓶1 个外植体，30d 统计污染率、死亡率及成活率。
1.3.2 初代培养在超净工作台上，将 0.5~1cm 的带腋芽茎段用 75%酒精漂洗 30s 后再用 0.1%HgCl2处理5min,最后用无菌水冲洗 5~6 次后接种于下列诱导培养基中。①MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L.②MS +6 -BA1.0mg/L +IBA0.1mg/L. ③ MS +6 -BA1.5mg/L +IBA0.2mg/L. ④ MS +6 -BA2.0mg/L +IBA0.2mg/L.30d 统计腋芽诱导率。
1.4 增殖培养
外植体接种到启动培养基上，生长 45d 后将萌发的腋芽接种于下列增殖培养基上。①WPM+6 -BA2.0mg/L +NAA0.05mg/L. ② WPM +6 -BA2.5mg/L+NAA0.05mg/L.③WPM+6-BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L.④WPM+6-BA3.5mg/L+NAA0.1mg/L.45d 后调查繁殖系数及不定芽的生长情况。
1.5 生根培养
将继代培养基中 2.0cm 左右的不定芽接种于下列生根培养基中。①WPM+NAA0.1mg/L.②WPM+NAA0.3mg/L.③WPM+NAA0.5mg/L.30d 后调查生根率及生根条数。
1.6 结果与统计
萌芽率=（未污染外植体芽萌发个数/接种外植体总数）×100%成活率=（存活外植体数/接种外植体总数）×100%增殖系数=不定芽增殖数/接种外植体数（有效芽的高度≥1cm）生根率=（生根苗数/总苗数）×100%采用统计分析软件 SPSS 18 for windows 对试验观察数据进行方差分析。
2 结果与分析
2.1 消毒时间对外植体成活的影响消毒时间对大马士革玫瑰外植体成活率影响显着。从表 1 可以看出：大马士革玫瑰腋芽茎段随着 HgCl2消毒时间的增加，真菌和细菌污染数逐渐降低；外植体成活率随消毒时间的增加逐渐升高，消毒时间超 5.5min,成活率逐渐下降。带腋芽茎段用 0.1%HgCl2消毒 5.5min,成活率最高（93.0%），且与其它处理成活率差异极显着。【1】
2.2 采样时期对外植体成活的影响采样时间对大马士革玫瑰外植体成活率影响显着。从表 2 可以看出：3~4 月采集的外植体污染率低于 1 月份和 7~8 月采集的外植体，成活率最高，达到 86.7%,与其它处理成活率差异显着；7~8 月采集的外植体成活率较低，为 71.7%;1 月份采集的外植体成活率最低。【2】
2.3 不同浓度组合的植物生长调节剂对启动培养的影响不同浓度组合的植物生长调节剂对大马士革玫瑰腋芽诱导率的影响差异显着。启动培养基为 MS+6-BA1.5mg/L+IBA0.2mg/L 的处理腋芽诱导率最高，为 75.0%,与其它处理的腋芽诱导率差异极显着。启动培养基为 MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L 的处理腋芽诱导率较高，达到51.0%,见表 3.【3】
2.4 不同浓度组合的植物生长调节剂对继代增殖培养的影响从表 4 可以看出：大马士革玫瑰丛生芽在不同的增殖培养基中培养时，增殖系数及生长状况存在较大差异。在所有处理中，大马士革玫瑰芽苗增殖系数随 6-BA 和 NAA 浓度的提高而增加，分别为 2.6、3.5、5.1 和 5.8;增殖系数越大，芽苗的长势越弱，增殖系数为 5.1,芽苗长势健壮；增殖系数为 5.8,芽苗又细又弱。WPM+6-BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L 为最佳的继代增殖培养基。【4】
2.5 不同浓度植物生长调节剂对生根的影响从表 5 可以看出：NAA 的浓度对大马士革玫瑰不定芽生根率及生根数影响显着。所有处理中，芽苗生根率随 NAA 浓度的提高而降低，生根率分别为 96.3%、82.7%和 82.4%;平均生根数都随 NAA 浓度的提高而增加，均在 5 条以上。
WPM+NAA0.1mg/L 的处理，大马士革玫瑰芽苗生根率最高，平均生根数 5.5 条，为最佳生根培养基，见表 5.
3 结论
采样时间及 HgCl2消毒时间对外植体成活率影响显着。3~4 月采集的外植体污染率最低，成活率最高，达到 86.7%.外植体成活率在一定范围内随灭菌时间的增加而升高，超过最佳灭菌时间，污染率降低，死亡率升高，成活率下降，主要是由外植体受到汞离子的毒害而导致的。带腋芽茎段用 0.1%HgCl2消毒 5.5min,成活率最高，达93.0%.
在启动培养阶段，腋芽诱导率最高的培养基为 MS+6-BA1.5mg/L+IBA0.2mg/L,腋芽诱导率为75.0% ,MS+6-BA1.5mg/L+IBA0.2mg/L 为最佳启动培养基。
继代培养阶段，大马士革玫瑰丛生芽在WPM+6-BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L 培养基中生长健 壮 , 增 殖 系 数 5.1,WPM +6 -BA3.0mg/L +NAA0.1mg/L 为最佳增殖继代培养基。
大马士革玫瑰芽苗在 WPM+NAA0.1mg/L 生根培养基中生根率最高，达到 96.3%,平均生根数5.5 条，WPM+NAA0.1mg/L 为最佳生根培养基。
参 考 文 献
[1]杨柳，崔亚宁，刘松，等。大马士革玫瑰 1 号精油香气成分的分析[J].北京农学院学报，2015,（3）。
[2]杨富强。大马士革玫瑰伊犁地区繁育技术[J].农村科技，2013,（12）：47-48.
[3]黄颖，胡磊，谷晴，等.“大马士革”玫瑰茎尖组培快繁技术研究[J].北方园艺，2014,（3）：104-106.
[4]吴新海，薛志忠。不同激素配比对大马士革玫瑰茎段继代增殖和生根培养的影响[J].安徽农学通报，2010,16（21）：58-61.
[5]赵蓓蓓，刘松，秦岭。大马士革玫瑰组培快繁体系的初步研究[J].园艺学报 2011,38（增刊 1）：26-30.
