摘 要： 本实验以黑果花楸果实为实验材料，对不同采摘日期果实可溶性固形物、总糖、含水量、总酸、维生素C、黄酮、多酚、花青素、果胶含量及其变化趋势进行测定与分析，目的是找出黑果花楸果实适宜的采收期。结果表明，采摘日期不同果实各项指标含量也不同，随着采摘日期的延长水分含量持续下降、可溶性固形物和总糖含量持续升高;总酸、维生素C、果胶、多酚含量各出现1个峰值，均呈先升高后下降的趋势;黄酮、花青素含量各出现2个峰值，呈波动式变化趋势。综合分析，9月26日—10月10日为黑果花楸果实适宜的采收期。
关键词 : 黑果花楸,理化指标,适直采收期:
黑果花楸果实具有营养、药用、生态等价值，黑果花楸果实和提取物具有抗氧化、消炎、抗癌、降血糖等功效，能明显改善和预防心脑血管疾病。在欧美发达国家常将黑果花楸提取物作为医药和保健食品，对治疗高血压和心脏病具有良好的作用[1]。近几年，辽宁、吉林、黑龙江、山东、新疆、内蒙古等地黑果腺肋花楸栽培面积逐步增加，仅吉林省延边地区栽培面积近666.67hm2[2]。果实成熟度受多种复杂因素的影响，不同地区不同果园，其土壤肥力、光照、温度、土壤湿度、果树密度等因素不同，果实的成熟度也不同，最适宜采收期也不同。国内在果实适宜采收期方面研究较多，张群等[3]研究黄桃适宜采收期，比较黄桃品质特征和微观结构变化;彭媛媛等[4]研究新疆白葡萄适宜采收期，分析葡萄理化指标和果实采收期之间的关系;习建龙[6]等研究晚熟脐橙品质变化和适宜采收期。但有关黑果花楸果实适宜采收期的研究至今少见报道。
本文通过对黑果花楸果实可溶性固形物、总糖、含水量、总酸、维生素C、多酚、黄酮、花青素、果胶9项指标进行测定，分析其变化趋势，目的是找出黑果花楸果实的适宜采收期，为黑果花楸果实加工利用以及消费者正确食用提供技术依据和数据参考。
1、 材料与方法
1.1、 实验材料
黑果花楸果实采自吉林省汪清县百草沟镇旺钦百果园。
1.2、 药品和试剂
硫酸、咔唑、乙醇、KCl、盐酸、CH3CO2Na·3H2O、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、福林酚试剂、碳酸钠、草酸、EDTA、偏磷酸、醋酸、钼酸铵、苯酚，以上试剂为分析纯。半乳糖醛酸、芦丁、没食子酸、抗坏血酸、葡萄糖，以上标准品均购自上海源叶生物科技有限公司，均为优级纯。
1.3、 主要仪器设备
BSA124S-CW电子分析天平，北京赛多利斯科学仪器有限公司;TDZ5-WS高速离心机，湖南湘仪实验仪器有限公司;HH.S型电热恒温水浴锅，江苏省医疗机械厂;WY-055手持式折光仪，长春市第四光学仪器厂;PHS-3C型酸度计，上海仪电科学仪器股份有限公司;UV1101紫外分光光度计，上海新茂仪器有限公司。
1.4、 实验方法
果实含水量参考GB 5009.3-2016，采用直接干燥法测量;可溶性固形物参考GB/T12295-90，用手持式折光仪测定;总酸测定参考GB/T 12456-2008，采用电位滴定法测定。
总糖测定参考刘志明等[7]和菜红梅等[8]方法，方法略有改变。取黑果花楸果实醇提溶液于3000r·min-1离心10min后稀释一定比例，吸取样液1m L，加入1m L 5%苯酚溶液，混匀，加入5m L浓硫酸振荡，静置30min,470nm下测定吸光度。使用葡萄糖标准品绘制标准曲线，计算总糖含量。
维生素C测定参考杨金风等[9]钼蓝比色法。称取适当样品，加入草酸-EDTA溶液，捣碎后放入50m L容量瓶定容，过滤后吸取25m L溶液于50m L容量瓶中，加入1.0m L偏磷酸-醋酸溶液和5%的硫酸2.0m L，摇匀后，加入4.0m L钼酸铵溶液，以蒸馏水定容至50m L,15min后测定吸光度，并利用标准曲线求其含量。
总多酚测定参考Folin-Ciocalteu法[10]，定量采用没食子酸作为标准品。取适当的稀释液1m L，加入5m L蒸馏水，加入1m L福林试剂，7.5%的碳酸钠溶液3m L，避光显色2h。于765nm波长下测定其吸光度值，利用曲线计算其含量。
总黄酮测定参考王晓林等[11]方法，方法略有改变。取样液1m L，加入0.5m L 5%亚硝酸钠后摇匀，放置6min。加入0.5m L 10%硝酸铝摇匀，放置6min，加入5m L 4%氢氧化钠，以60%乙醇定至10m L，摇匀，放置15min，以3500r·min-1离心10min，取上清液在509nm下测定吸光度，利用标准曲线计算总黄酮含量。
花青素测定参照马养民[12]的方法，经单因素试验最终确定，以水为提取溶液，1∶25的料液比，在30℃的水浴中浸提0.5h，经过滤用紫外可见光分光光度计在543nm下测定吸光值，并按公式计算黑果花楸果实的花青素含量。
果胶物质的测定参考庞荣丽等[13]的方法，方法略有改动。称取样品2g，加入50m L 95%乙醇，加热回流30min，过滤除去糖分及杂质，将沉淀物移入原三角瓶中，加蒸馏水40m L，在50℃水浴中加热并保持30min，过滤、洗涤。滤液移入50m L容量瓶定容，此为可溶性果胶测定液。沉淀物加0.5mol·L-1硫酸100m L,90℃水浴加热1h，冷却，移入250m L容量瓶定容，此为原果胶测定液。吸取稀释液1m L放入试管中，加入5m L浓硫酸，摇匀，在冷水中冷却15min。在85℃水浴中加热20min，冷却15min。加入0.25m L 0.15%咔唑混匀，放置30min。在529nm处测吸光度。
1.5、 统计分析
所有数据利用SPSS ver.25.0 package program进行统计分析。
2 、结果与分析
2.1、 黑果花楸果实不同采摘日期含水量的测定与分析
图1 黑果花楸果实不同采摘日期含水量比较
由图1可知，8月27日采摘的黑果花楸果实含水量最高，10月25日含水量达到最低，5个采摘日期果实样品水分含量之间均存在显着性差异(p<0.05)。随着采摘日期的延长，黑果花楸果实含水量呈现持续降低趋势。
2.2 、黑果花楸果实不同采摘日期可溶性固形物与总糖含量的测定与分析
由图2、图3可知，5个采摘日期的样品可溶性固形物均存在显着性差异(p<0.05);总糖除9月26日和10月11日不存在显着性差异外，其它日期均存在显着性差异(p<0.05);可溶性固形物和总糖含量均在10月25日达到最高。随着采摘日期的延长，可溶性固形物和总糖呈现逐步递增趋势，采收时间越晚，可溶性固形物和总糖越多，这是因为随着采摘日期延长，果实内合成酶逐步减少，降解酶逐步增加，由淀粉转化为糖[14]，可溶性固形物和总糖含量都增高。再结合图1,5个采摘日期果实含水量呈现降低趋势，相应提高了果实总糖和可溶性固形物含量，使两者逐步升高。采摘过程中发现，10月11日后采摘的果实表皮已经皱缩，商品化程度降低。从这个角度分析，黑果花楸宜在10月10日之前采收。
图2 黑果花楸果实不同采摘日期可溶性固形物比较
图3 黑果花楸果实不同采摘日期总糖含量比较
2.3 、黑果花楸果实不同采摘日期总酸含量的测定与分析
图4 黑果花楸果实不同采摘日期总酸含量对比
由图4可知，5个采摘日期黑果花楸果实样品的总酸含量之间均存在显着性差异(p<0.05)。随着采收期的延长，总酸含量呈现先升高再降低的趋势，8月27日—9月12日呈升高趋势，9月12日最高，9月12日后呈降低趋势，尤其9月26日后含酸量下降很快。这是因为随着果实的成熟，呼吸作用加强，部分总酸分解。不论是鲜食还是加工，果实含酸量都不宜太高，从这个角度分析，黑果花楸宜在9月26日后采收。
2.4、 黑果花楸果实不同采摘日期维生素C含量的测定与分析
由图5可知，8月27日与9月12日2个采摘日期样品的维生素C含量无显着性差异，9月26日、10月11日、10月25日3个采摘日期维生素C含量之间均存在显着性差异(p<0.05)，且都与8月27日或9月12日的样品有显着性差异。在5个采摘日期中，维生素C含量呈先升高后下降的趋势。9月12—26日维生素C含量增加较快达到最高，9月26日—10月11日下降较慢。从维生素C含量角度分析，9月26日—10月10日为黑果花楸果实适宜的采收期。
图5 黑果花楸果实不同采摘日期维生素C含量对比
2.5、黑果花楸果实不同采摘日期总果胶含量的测定与分析
图6 黑果花楸果实不同采摘日期果胶对比
由图6可知，5个采摘日期的样品果胶含量均存在显着性差异(p<0.05)。黑果花楸果实样品果胶含量呈现先增加后降低的趋势。这是因为随着采收期的延长，黑果花楸果实逐渐成熟，至9月26日果胶合成量达到最高，以后果胶酶活性逐渐升高，果胶分解含量开始下降。从果胶的含量看，9月26日果胶含量最多，为适宜采收期。
2.6 、黑果花楸果实不同采摘日期多酚含量的测定与分析
图7 黑果花楸果实不同采摘日期多酚含量对比
由图7可知，5个采摘日期样品的多酚含量均存在显着性差异(p<0.05)。8月27日—9月12日多酚含量呈增加趋势，9月12日达到最高，之后呈稳定下降趋势，是因为随着采摘日期的延长，黑果花楸果实内部发生生理生化变化，多酚合成与分解处于动态平衡，合成大于分解含量增加，分解大于合成含量下降。多酚具有较强的抗氧化性，对正常细胞具有保护作用，同时抑制癌细胞[15]。多酚含量太高口感苦涩，不论鲜食还是加工产品都不宜太高，结合图1含水量指标综合分析，9月26日—10月10日为适宜采收期。
2.7 、黑果花楸果实不同采摘日期黄酮含量的测定与分析
图8 黑果花楸果实不同采摘日期黄酮对比
由图8可知，5个采摘日期样品的黄酮含量均存在显着性差异(p<0.05)。随着采摘日期的延长，黑果花楸果实样品的黄酮含量呈现出低→高→低→高→低波动式变化趋势，其中10月11日达到最高。黄酮具有提高人体造血能力、提高人体免疫力、保护DNA预防基因突变等的功效[16]。黄酮含量高可作为保健食品的优质原料。从保健作用分析，综合考虑前述各指标，9月26日—10月11日为适宜采收期。
2.8、 黑果花楸果实不同采摘日期花青素含量的测定与分析
由图9可知，5个采摘日期的样品花青素含量均存在显着性差异(p<0.05)。随着采摘日期的延长，黑果花楸果实样品花青素含量与黄酮一样呈现出低→高→低→高→低波动式变化趋势，其中9月12日和10月11日各出现1个峰值，此期间为适宜的采收期。花青素具有抗氧化、抗炎症、抗癌、抗肥胖、降血糖等多种药理作用[17]。
图9 黑果花楸果实不同采摘日期花青素对比
3 、讨论
黑果花楸果实各成分指标受栽培方式[18]、气候、土壤水分[19]、土壤酸碱度[20]、光照、肥料等多方面影响，不同采摘年份、不同采摘地点，结果可能存在一定的差异，本实验样品来自汪清县百草沟镇旺钦百果园，其它地区黑果花楸有待于以后继续研究。本实验仅为2020年的实验结果，其它年份的实验结果有待于以后继续研究。
4 、结论
本文对不同采摘日期黑果花楸果实9个指标进行了测定与分析。其中，可溶性固形物、总糖适宜10月10日前采收，总酸、果胶适宜9月26日左右采收，维生素C、多酚、黄酮适宜9月26日—10月10日期间采收，花青素适宜9月12日—10月10日采收。综合考虑黑果花楸果实的营养、保健和商品化价值，吉林省延边地区9月26日—10月10日，即国庆节前后为黑果花楸果实适宜的采收期。
参考文献
[1]胡文泽,李淼,郭东旭，莹,岳国鑫, 马凤鸣.果腺肋花楸研究进展[J] .食品与发酵工业, 2020,46(23):316-322.
[2]彭琳.黑果腺肋花楸的研究现状及培育技术探究[J] .种子科技, 2020,38(2):55-56.
[3]张群,舒楠,张维,李绮丽.不同采收期黄桃的品质特性和微观结构变化[J] .保鲜与加工, 2021,21(04):29-34.
[4]董凯向，彭媛媛,贾舟楫,褚佳瑶,周龙,方海龙.葡光互补栽培对吐鲁番无核白葡萄果实品质的影响[J] .经济林研究, 2019,37(01):155-160.
[5]刘仪英，谭峰, 魏召新,洪林,吴纯清,程昌凤.徐家白柚适宜采收期及果实耐贮性研究[J] .中国南方果树, 2016,45(04):55-56,60.
[6]习建龙,袁高鹏，彭良志,袁梦,张梦娇,彭震宇,淳长品,江才伦,付行政.重庆三峡库区晚熟脐橙品质变化和适宜采收期研究[J] .中国南方果树, 2016,45(04):1-6.
[7]刘志明,唐彦君, 吴海舟,等.苯酚-硫酸法测定葡萄酒中总糖含量的样品处理[J] .中国酿造, 2011(02): 158-161.
[8]蔡红梅,田子玉.苯酚硫酸法测定草莓中总糖含量[J] .吉林农业, 2019(04):46.
[9]杨金凤，黄玉琴,呼丽萍.钼蓝比色法测定甜樱桃中还原型VC含量的条件优化[J] .湖北农业科学, 2015,54(01):181-184.
[10]牛雪.福林酚法测定葡萄酒总酚的优化研究[D] .银川:宁夏大学, 2015.
[1]王晓林,金龙哲,钟方丽，于硕.桂皮总黄酮的纯化工艺及其抗氧化性研究[] .中国食品添加剂, 2018(01):119-127.
[12]马养民,逯文静.蓝莓果中花青素的乙醇提取工艺研究[J] . 安徽农业科学, 2011,39(35):21768-21769.
[13]庞荣丽,张巧莲,郭琳琳,方金豹,谢汉忠,李君，罗静，吴丰魁.水果及其制品中果胶含量的比色法测定条件优化[J] .果树学报, 2012,29(02)-:302-307.
[14]李云峰,范竞升,陈冰琳,等.3个甜玉米品种在不同储藏条件下可溶性固形物含量及挥发性风味成分变化[J] .华南农业大学学报, 2021.4203):33-44.
[15]王钊,张滨,李凤娇,李玉江,张本尚,邹建.酸法提取黑蒜多酚及抗氧化性研究[J] .中国食品添加剂, 2021,32(10):15-22.
[16]刘宝剑,红车轴草总黄酮抗氧化及增强机体免疫力的研究.河北省,河北北方学院, 2010-07-25.
[17]刘腾飞,陆皓茜,李军,杨代凤,朱松.莲中原花青素的研究进展[J/OL].食品与发酵工业: 1-10[2021-11-04].
[18]刘丽娜.不同整地措施对朝阳地区山地黑果腺肋花楸栽植效果的影响[J] .防护林科技, 2021(01):49-51,66.
[19]胡艳,艾力江麦麦提,安尼瓦尔艾木都，古丽买然木吐尼亚孜，阿不都外力.吐尔洪.土壤干早胁迫及复水对黑果腺肋花楸生理指标的影响[J] .湖南农业科学, 2020(04):12-15.
[20]姜镇荣,马兴华,韩文忠,孙文生.辽西地区土壤酸碱性对黑果腺肋花楸生长的影响与改良办法[J] .陕西林业科技, 2013(04):31-33.
