利用RT-PCR法检测6月龄八眉、长白和长×八杂交猪后腿部比目鱼肌、腓肠肌和趾长伸肌中FoxOl基因的表达量[32],结果发现，FoxOl基因在八眉猪和杂交组合猪骨骼肌中的表达量均显着高于长白猪，表明FoxO1很可能对猪骨骼肌的含量进行负调控，此基因很可能是导致不同经济类型猪肌肉发育过程产生差异的主要基因之一[33],同时还发现在以IIb型纤维为主的趾长伸肌中表达丰度远远高于以I型纤维为主的比目鱼肌，表明FoxOl基因的表达与I型肌纤维的含量成反比，FoxOl基因调控不同经济类型猪品种骨骼肌的发育。同年，又研究发现FoxOl和成肌分化抗原（myogenic differentiation anti-gen, MyoD）基因mRNA的表达在不同经济类型猪肌肉发育中存在负相关，相关系数为 0.728[34].利用RT-PCR、Western blotting等检测在猪成肌细胞分化过程中 FoxO1 早期和晚期 MyoD 及肌细胞生成素（myogenin, MyoG）的表达变化，结果发现，尽管FoxO1 mRNA表达量显着增加，但总蛋白量变化不显着，显着上调了其磷酸化水平[35];同时，高表达FoxO1 的猪成肌细胞中，MyoD 蛋白变化不显着，MyoG水平却明显降低，表明猪成肌细胞的分化时间推迟及被抑制分化很可能是因为 FoxO1 作用的结果。FoxO1在180日龄大白猪比目鱼肌、趾长伸肌、腓肠肌和背最长肌中的表达差异均不显着，其蛋白表达与 MyHC 各亚型呈显着相关，用青霉素（wort-mannin）处理原代培养的猪骨骼肌成肌细胞的第3和5天时，FoxO1蛋白与MyHC I、MyHC IIa和肌细胞增强因子 2c（MEF2c）表达均呈显着负相关[36],表明FoxO1很可能是通过抑制MyHC I的表达来调控肌纤维类型。FoxO1很可能是通过抑制神经钙蛋白（cali-cineurinm, CaN）/活化T细胞核因子（nuclear fac-tor of activated T cells, NEAT）信号通路或CaN/MEF2信号通路对I型肌纤维的表达进行负调控[37];2、5月龄民猪和长白猪的肾周脂肪中FoxOl基因表达量极显着高于1、6、8月龄，并发现FoxO1可能通过 抑 制 PPARγ、 CCAAT 区/增 强 子 结 合 蛋 白 α（CCAAT/ enhancer binding protein α， C/EBPα）基因的表达来减少脂肪沉积[38].
4 钙蛋白酶抑制蛋白（Calpastatin, CAST）基因
钙蛋白酶抑制蛋白（calpastatin, CAST）基因是一种特定的、内源性的、需钙激活的蛋白酶抑制剂，被定位于猪的2号染色体上[39].CAST基因与肌肉嫩度存在极其紧密的联系，其产物对于肌肉生长过程中蛋白质的更新具有重要作用。在细胞内普遍存在着需钙蛋白酶（calpain）的蛋白水解系统，大量参与到生长和代谢过程。钙蛋白酶系统主要包括钙蛋白酶和钙蛋白酶抑制蛋白。钙蛋白酶根据其表现半最高活性所需的 Ca2+浓度分为 2 类，钙蛋白酶 1（u-calpain）和钙蛋白酶2（m-calpain）。活体屠宰后较低浓度的Ca2+就可以激活u-calpain,使其表现出蛋白水解酶活性。如果附近有 CAST,就可迅速与u-calpain结合，抑制蛋白酶的活性，从而抑制肌肉内蛋白质的降解，促进蛋白质的合成，提高肌细胞生长速度[40].猪肉的嫩度与CAST/u-calpain的活性比值有密切的联系，活性比值越大，CAST的量相对越大，钙蛋白酶抑制蛋白对钙蛋白酶的抑制作用越强，肉的嫩度越好[41].对125头杂交猪进行多态位点研究并分析其对猪的肉质和背膘的影响时发现，其中A、B 2个位点均对肌内脂肪含量有显着影响，B、C、D 3个位点均对背膘厚有显着影响[42].对3个猪品种钙蛋白酶抑制蛋白基因多态性进行了研究，结果发现钙蛋白酶抑制蛋白基因的一定基因型与猪肉的嫩度存在相关性。由此看来，钙蛋白酶抑制蛋白主要通过影响猪肉的嫩度来改变猪肉的肉质性状[43].
5 促黑激素皮质素 4 受体（Melanocortin-4 receptor,MC4R）基因
促黑激素皮质素4受体（melanocortin- 4 re-ceptor, MC4R），由332个氨基酸残基组成，是跨膜G-蛋白偶联受体（G-protein coupled receptors,GPCRs）超家族的成员之一[44].MC4R能够通过中枢神经系统调节体重，主要表现为抑制摄食，导致血糖、胰岛素和瘦素水平降低，从而减少体脂、降低体重，在动物的体重、能量稳态和采食量的调控中具有重要作用[45].猪 MC4R 基因位于 1 号染色体q22-27 处，与猪 1 号染色体上的数个标记明显连锁，用两点连锁分析得到的两个离MC4R基因最近的连 锁 标 记 是 SO3113（0, 17.76）和 S0082（0.05,14.74）[46].
MC4R基因型与背膘厚和生长率以及采食量呈强相关，AA基因型背膘比BB基因型薄9%,BB基因型比AA基因型日增重高37 g/d,且差异显着[47].不同的MC4R基因型间肉质指数、最后肋骨处背膘厚、腰部背膘厚、平均背膘厚、平均日增重、肌肉中乳酸的集中差异显着[48].猪MC4R基因第7跨膜结构功能区域的一个高度保守区存在G-A错义突变，产生TaqI酶切位点的改变，这一突变使MC4R蛋白第298位氨基酸天冬氨酸被天冬酰胺代替[49].对不同品系猪该位点的多态与生产性能关系的研究，证实了MC4R基因型与背膘厚、生长率和采食量呈强相关[50].猪MC4R基因存在一个氨基酸编码的错义突变，可导致猪胴体重和采食量显着变化[51].
综上所述，Leptin、UCP3、FoxO1、CAST、MC4R基因对猪的脂肪沉积与代谢均起重要作用。尽管对这些基因的结构和表达调控规律有了一些认识，但具体调控机理和分子机制还有待于从细胞水平和分子水平上作进一步研究[52].另外，希望在不久的将来能利用这些猪肉质性状主要功能基因进行肉质改良等育种工作，为优质肉质性状的猪品种的育种实践提供依据，从而获得更高品质的猪肉来满足人们的需求[53].
参考文献
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