随着物质生活水平的提高,人们对食品的质量安全也提出了更高的要求。于是,寻求健康绿色的饲料添加剂,减少甚至消除抗生素的使用成为了众多学者及畜禽养殖者们最关注的问题之一。近年来的研究表明,谷氨酰胺 ( Gln) 是替代抗生素的理想添加剂。国内外学者们对 Gln 在动物营养方面的应用已有不少研究,但对其在营养免疫方面的研究却不多。试验在日粮中添加不同量的 Gln,拟探究其对保育猪生长性能及猪瘟和口蹄疫抗体水平的影响。
1 材料与方法
1.1 试验分组
选择 270 头日龄在 ( 29 ± 2) d 的生长发育良好的 ( 杜 × 长 × 大) 三元杂保育猪,将其按相近体质量随机分成 5 个组,每组 3 个重复 ( 栏) ,每重复 18 头仔猪,公母比例相近。其中 1、2 和 3 组为试验组,4 组为阿莫西林对照组,5 组为阴性对照组,各组日粮设计见表 1。试验猪饲粮组成与营养水平见表 2。
1.2 饲养管理以及免疫设计
试验猪只自由釆食和饮水,遵循猪场常规管理程序,定期进行驱虫和免疫。预饲期 7 d,试验期65 d,试验正式开始当天,对所有试验个体进行称质量,记录初始体质量。在仔猪到达 ( 75 ± 2) 和( 93 ±2) 日龄时,分别对试验猪进行空腹称质量,并记录体质量 ( 75 日龄时为保育期结束,93 日龄是属于生长期,所以分别测定和分析) 。同时,记录试验中的给料量和剩料量。【表1】
根据猪场的免疫程序,在仔猪 40 日龄时,对各组首免猪瘟疫苗,并在首免后第 7 天、第 15 天和第 22 天 ( 即试验猪 47、55 和 62 日龄) ,进行前腔静脉采血,用于猪瘟抗体检测。在试验猪 63 日龄时,对其进行猪瘟二免,二免后7、14、21 和28 d( 即试验猪 70、77、84 和 91 日龄) ,进行前腔静脉采血,用于猪瘟二免抗体检测。同时,在仔猪 48日龄时,各个组免疫口蹄疫疫苗,免疫后第 7 天、第15 天、第22 天和第29 天 ( 即试验猪55、62、70和 77 日龄) ,进行前腔静脉采血,用于口蹄疫病毒O 型 ( FMDV - O) 抗体检测,每重复随机挑选 4 头仔猪进行采血,共5 个组,每组3 个重复,见表3。【表2-3】
1.3 试验药品
L - Gln,产地为美国,白色粉末; 水溶性阿莫西林,产地为广州,白色或类白色粉末; 猪瘟病毒抗体检测试剂盒,北京爱德士元亨生物科技有限公司提供; FMDV - O 抗体检测试剂盒,韩国金诺VDPro 提供; 猪瘟疫苗,广东永顺生物制药有限公司提供; 口蹄疫疫苗,金宇宝灵生物制药提供。
1.4 测定项目
测定保育仔猪的平均日采食量、平均日增质量和料重比。根据试验设计进行前腔静脉采血,用离心机以 2 500 r/min 的转速离心 10 min,分离血清,用于猪瘟抗体水平和猪血清中 FMDV - O 抗体水平的检测。
1.5 数据处理与分析
试验 数 据 运 用 Excel 软 件 进 行 处 理 后,用SPSS17. 0 数据统计软件进行单因素方差分析,用Duncan 氏法进行多重比较,当 P < 0. 05 时,差异显着,当 P <0. 01 时,差异极显着。结果用平均数 ±标准差表示。
2 结果与分析
2.1 Gln 及抗生素对保育猪生长性能影响的比较分析
从表 4 可见: Gln 对猪只生长性能的影响主要表现在 76 ~93 日龄的时间段内,而在 29 ~75 日龄的时间段内的影响差异不显着 ( P >0. 05) 。76 ~93日龄阶段内,平均日增质量,2 组的平均日增质量最高,能极显着地提高仔猪日增质量 ( P <0. 01) 。平均日采食量,1 组的采食量极显着高于其他各组( P <0. 05) 。料重比,2 组的最低,极显着低于其他各组,尤其低于 4 组 ( P < 0. 01) 。
2.2 Gln 及抗生素对猪瘟抗体水平影响的比较分析
从表 5 可见: 40 日龄对仔猪进行猪瘟疫苗首免后的 3 周内,2、4 和 5 组的初始 OD 值表现较高,而后出现下滑趋势,而 1 和 3 组的初始 OD 值较低,但在随后的 2 周内表现出上升趋势。首免第 3 周,虽然 4 组有上升趋势,但也低于 3 和 5 组。63 日龄时对试验猪进行猪瘟二免,3 组能有效维持其抗体水平 1 周并高于其他各组,且在二免第 3 周时,猪瘟抗体水平达最高峰,其抗体上升幅度最大。其次为 4 组,但是其在二免第 4 周,抗体水平降至最低。1 组在二免第 3 周上升幅度虽不比 4 组大,但在二免第 4 周,抗体水平下降得很平缓,相对于 4组维持在更高的抗体水平。【表4】
2.3 Gln 及抗生素对口蹄疫抗体水平影响的比较分析
从表 6 可见: 1 组在免疫后各阶段的 OD 值都比其他各组高,在免疫后第 3 周达到最高峰,下降趋势也相对缓慢; 2组的OD值也在第3周到达最高峰,其水平相对较低,但仍高于 4 组; 3 组在免疫后各阶段的 OD 值都处于上升趋势,但其经过 4周才达到 1 组的最低 OD 值水平,而整个试验阶段的 OD 值均高于 2 和 4 组; 5 组在整个免疫试验阶段,其 OD 值变化趋势和 2 组相似。4 组在免疫 1周后,OD 值相对较小,在免疫 2 周后达到它的最高峰,但仍然低于各试验组,随后的第 3 周和第 4周,其 OD 值迅速下降,下降幅度较大。【表6】
3 讨论
3.1 Gln 及抗生素对生长猪生长性能的影响
Gln 是猪只体内一种重要的条件性必需氨基酸,它为猪只快速生长和细胞分化提供主要的能量来源,能促进淋巴细胞的增殖,在仔猪营养的维持与免疫功能的发挥上起到举足轻重的作用。断奶应激使仔猪肠道黏膜萎缩和功能紊乱,免疫功能下降、饲料利用率降低和生长受阻。而 Gln 可以在一定程度上减轻断奶应激造成的生长抑制作用,促进仔猪的生长。另有大量研究证实,Gln 能有效的缓解断奶仔猪的腹泻,提高猪只生产性能。试验结果表明,Gln 对猪只生长性能的影响主要表现在 76 ~93日龄的阶段内。76 ~93 日龄阶段内,平均日增质量方面,2 组的平均日增质量最高,能极显着地提高仔猪日增质量 ( P <0. 01) 。料重比方面,2 组的最低,极显着低于其他各组 ( P <0. 01) ,尤其低于 4组 ( P < 0. 01) 。可见,在日粮中添加 1. 0%的 Gln能提高仔猪的生长性能,其影响在 76 ~ 93 日龄阶段达极显着水平 ( P <0. 01) 。而在仔猪生长过程中使用阿莫西林对降低料重比效果相对较弱。Gln 之所以能提高断奶仔猪生长性能主要归功于它对仔猪肠道的吸收功能的改善作用。Gln 通过促进仔猪肠道黏膜细胞的修复与更新,维持肠道黏膜的完整性,使其能够正常的发挥局部免疫功,在一定程度上削弱断奶应激带来的生长抑制。正因如此,29 ~75 日龄阶段的仔猪在 Gln 的作用下,表现出比 4 和5 组更优的生长性能,并且在 76 ~ 93 日龄阶段,在平均日增质量、平均日采食量和料重比方面极显着的优于 4 和 5 组 ( P <0. 01) 。
另外,对于 Gln 促生长效果的阶段性差异,试验的阶段性与张建刚等 ( 2012) 的研究结果类似,他发现日粮中添加 1. 0%的 Gln 在 28 ~38 日龄对仔猪作用效果不明显,而在 38 ~ 49 日龄可显着提高日增质量降低料重比。但是,杨彩梅等 ( 2005) 认为,仔猪饲粮中添加 Gln 可显着提高试验前期 ( 21 ~35 日龄) 和整个试验期 ( 21 ~ 49 日龄) 的平均日增质量。综合考虑,试验中出现的阶段性差异,可能是因为仔猪生长发育的阶段性差异引起。综上所述,基础日粮中添加 Gln 能提高保育猪的生长性能,而 1. 0%的添加量可达到最优效果。
3.2 Gln 及抗生素对猪瘟抗体产生的影响
除了其他一些客观原因,导致首免失败的重要原因之一来源于仔猪体内母源抗体的干扰。母源抗体是仔猪从母体初乳和胎盘得到的抗体。猪瘟的母源抗体虽然能为新生仔猪早期的健康提供保障,但却对猪瘟疫苗的免疫效果造成干扰,导致免疫失败。试验中,在仔猪猪瘟首免 2 和 3 周后,2、4 和5 的 OD 值出现迅速下滑趋势,其中以 4 组下滑幅度最大,说明抗生素对抗体的产生起到抑制作用,这与吴家强等 ( 2010) 的研究结果相同。4 和 5 组的猪瘟抗体水平之所以出现迅速下滑趋势,是因为母源抗体中和了疫苗的有效成分,使免疫效果减弱。相反,1 和 3 组的 OD 值呈现上升趋势,且比 4组高出了 0. 299。Gln 作为机体内免疫系统的重要燃料,是细胞生长和分化的主要能量来源,能促进淋巴细胞的生长和增殖,维持仔猪营养免疫的功能,同时它还是调节机体蛋白质代谢的重要因子。
Gln 的这些功能为猪只体内抗体的产生提供了有利条件。适宜添加量的 Gln 能使试验猪猪瘟抗体水平在母源抗体存在的情况下,仍有上升趋势,所以,日粮中添加 1. 5% 的 Gln 可增加体内猪瘟抗体的产生几率,能削弱甚至避开母源抗体的干扰。
实际生产当中,猪只在猪瘟首免时正处在保育阶段关键时期,生理机能发育不完善,抵抗力低下。而在现有养猪生产条件下,而在现有条件下,为了获得即时的效益,大部分猪场不得不饲喂含有一定抗生素药物的颗粒料来预防以上疾病,甚至过量使用抗生素类药物来治疗这些疾病。然而,这种饮鸩止渴的方法不但不能根治这些疾病,反而会影响到保育猪猪瘟和口蹄疫抗体的产生,导致仔猪免疫失败,带来更为严重的后患。而使用 Gln 不但弥补了保育猪生理机能发育不完善的缺陷,还从抗体产生的源头上解决了因抗生素的使用或母源抗体的干扰导致的免疫失败的问题。
另外,试验结果表明,仔猪进行猪瘟疫苗二免,尤其是二免 3 周后检测到的抗体水平显着高于猪瘟疫苗首免的抗体水平 ( P <0. 05) 。这一结果与赵永庆 ( 2003) 的观点相符。表明在基础免疫过后再进行一次强化免疫,能使动物机体内的抗体水平快速升高,取得更好的免疫效果。而提高抗体水平是获得抵抗野毒袭击的抗体,维持抵挡病毒攻击持续时间的有效途径。所以为了提升仔猪的免疫力,增强对猪瘟病毒的抵抗力,我们有必要对仔猪进行第二次猪瘟疫苗的免疫。
3.3 Gln 及抗生素对口蹄疫抗体水平影响的差异
试验结果表明,在仔猪 48 日龄时进行口蹄疫免疫 1 周后,1 组的 OD 值最高,2 和 4 组的 OD 值相对其他组较低。涂长春 ( 2005) 的研究表明,仔猪在进行疫苗免疫时会受到母源抗体的干扰,使免疫效果减弱甚至导致免疫失败,所以,在给仔猪制定免疫程序时应当结合考虑当下日龄母源抗体的水平。1 组的 OD 值高于 5 组,说明日粮中添加 0. 5%的 Gln 能削弱甚至避开母源抗体的干扰。而1、3 及5 组的 OD 值均高于 4 组,说明 Gln 对口蹄疫抗体的产生起到促进作用。从口蹄疫疫苗免疫后抗体水平的整体变化趋势来看,1 组在免疫后各阶段的 OD值均高于其他各组,在免疫后第 3 周达到最高峰,降价趋势也相对缓慢,表现出较优的免疫效果; 2组也在第 3 周达到 OD 值的最高峰,但是其值低于1 组,高于 4 组; 3 组的 OD 值一直处于上升趋势,虽然没有 1 组的高,但也一直高于 2 和 4 组。这说明随 Gln 添加量的增加,OD 值呈现不规律的下降趋势,而由于对这方面内容前人研究较少,这种情况尚需更深入的研究。4 组在免疫 2 周后达到它的最高峰,随后其 OD 值大幅度下降。这说明阿莫西林的使用会抑制口蹄疫抗体的产生以及其维持的时间,同时,张华 ( 2008) 的研究也表明在免疫前后使用对免疫系统有影响的抗菌药物和抗病毒药物会影响免疫效果。所以,猪场在加强隔离消毒,制定免疫程序的同时,也应重视减少抗生素的使用。综上所述,日粮中添加 0. 5% 的 Gln 能提升仔猪免疫力,增加抗体产生的几率,减少甚至避开母源抗体的干扰,同时减弱抗生素对抗体形成的抑制作用,使抗体水平变化趋势达到最佳免疫效果。
4 小结
试验以 ( 杜 × 长 × 大) 三元杂保育猪为试验对象,探讨了在日粮中添加不同量的 Gln 对仔猪生长性能,体内猪瘟和口蹄疫抗体水平的影响,通过以上分析得出结论如下: 基础日粮中添加 Gln 能提高保育猪的生长性能,并以 1. 0% 的添加量为优; Gln在减少母源抗体干扰,维持抗体水平最佳变化趋势、提高免疫效果方面有一定作用,而提高猪瘟、口蹄疫抗体水平的 Gln 最佳添加量分别是 1. 5% 和0. 5% 。实际生产当中,可以根据仔猪生长时间,免疫程序的制定来调整 Gln 的添加量,以获得最佳生产效益。同时,为了保证猪群健康,对猪群进行猪瘟二免是必要的。综上所述,日粮中添加 Gln 能有效提升仔猪的生长性能,增加其体内猪瘟和口蹄疫抗体的水平。
参考文献
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