2.5 细胞内源致病因子的检测
刺激后的第 3代 hASCs 细胞进行实时定量PCR检测人源特定病毒包括HBV、HCV、CMV进行DNA表达量，检测结果均为阴性（<5.00E+02 copy）。
2.6 内毒素检测结果
刺激后的第 3 代 hASCs细胞通过“鲎试剂灵敏度复核试验”法检测细胞培养上清中内毒素含量，结果均为阴性，λ=0.25 EU/mL,浓度值均<2.83 EU/mL.
2.7 革兰氏染色结果
刺激后的第 3 代 hASCs细胞染色，油镜下观察，结果均无革兰氏细菌生长。
3 讨 论
干细胞应用于临床治疗和再生医学的潜能已被干细胞研究者们广泛关注。而一个治疗的疗程至少需要1×107个细胞，但从患者、捐赠者身上无法获得足够的hASCs,限制了其应用[15].有学者探索通过改变各种培养条件，如不同的细胞因子和生长因子，促进体内来源的ASCs体外扩增，目前尚未取得临床相关结论。Jie Chen团队研究发现LIPUS不仅促进人类脐带和骨髓来源的间充质干细胞（MSC）的增长和集落形成，而且促进造血祖干细胞（HSPC）增殖和分化[12],表明可利用LIPUS来获得更多MSC以用于临床[12,16].
通过研究，笔者发现强度为60 mW/cm2的LIPUS有效促进hASCs的扩增，与对照组比较细胞数量增加约17%,细胞倍增时间缩短为对照组的0.875倍。需要的细胞数量少，且刺激时间短，是有效扩增hASCs的方法之一。本实验存在的不足是未进行更低频率刺激和延长刺激时间研究。
研究显示，LIPUS 不仅能促进 HSPC 亦能促进hASCs 有效增殖。LIPUS 刺激不改变干细胞培养条件，只改变细胞微环境或能量转换使干细胞增殖，避免外源细胞因子和生长因子等影响。因此，我们的研究结果将可以为干细胞体外快速增殖和产业化提供新途径。下一步我们将验证其增殖的安全性。
参 考 文 献
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