复方氨酚烷胺制剂包括复方氨酚烷胺片、复方氨酚烷胺胶囊、小儿复方氨酚烷胺片及复方氨酚烷胺颗粒 , 其主成分种类 ( 对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺、马来酸氯苯那敏、咖啡因、人工牛黄 )、配比 (125∶50∶1∶7.5∶5) 均一致。其中对乙酰氨基酚能抑制前列腺素合成 , 有解热镇痛的作用 ；金刚烷胺可抗“亚 - 甲型”流感病毒 , 抑制病毒繁殖 ；咖啡因为中枢兴奋药 , 能增强对乙酰氨基酚的解热镇痛效果 , 并能减轻其他药物所致的嗜睡、头晕等中枢抑制作用 ；马来酸氯苯那敏为抗过敏药 , 能减轻流涕、鼻塞、打喷嚏等症状 ；人工牛黄具有解热、镇惊作用。上述诸药配伍制成复方 , 可增强解热、镇痛效果 , 解除或改善感冒所致之各种症状 , 主要用于缓解普通感冒及流行性感冒引起的发热、头痛、鼻塞、咽痛等症状 , 也可用于流行性感冒的预防和治疗。国内共有132 家药厂生产该品种的各种制剂 , 为国内应用范围最广的抗感冒药之一。为更好地控制产品质量 , 作者采用薄层鉴别法鉴别人工牛黄中的胆红素 , 该方法重复性好、专属性强 , 简便高效 ,结果准确可靠。
1材料与方法
1. 1材料 仪器：薄层数码成像系统 (visualizer, 瑞士 CAMAG公司 ), BP211D 电子天平 (Sartorius 公司 )。试剂 ：所用试剂石油醚 (30~60℃ )、环己烷、乙酸乙酯、甲醇、冰醋酸、甲苯、三氯甲烷、甲酸乙酯、甲酸等 ( 均购自安徽安特生物化学股份有限公司 ) 均为分析纯。柱层析硅胶 G、国产硅胶 G 预制板 ( 均购自青岛海洋化学有限公司 ) 及进口硅胶 G 预制板 ( 购自美国 Merck 公司 )。人工牛黄对照药材 (121197-200903)、胆红素对照品 (100077-200805)( 均购自中国药品生物制品检定研究院 ) ；复方氨酚烷胺片样品 128 批 , 复方氨酚烷胺胶囊样品 110 批 , 小儿复方氨酚烷胺片样品 7 批及复方氨酚烷胺颗粒样品 8 批 , 共计 253 批供试品。
1. 2供试品溶液的制备 分别取复方氨酚烷胺片 10 片、复方氨酚烷胺胶囊 10 粒、小儿复方氨酚烷胺片 10 片及复方氨酚烷胺颗粒 10 袋 , 混匀 , 研细 , 称取细粉 ( 相当于人工牛黄30 mg), 加氯仿 20 ml 超声提取 , 过滤 , 滤纸和滤渣用少量氯仿洗涤 , 合并滤液和洗液 , 室温挥干 , 残渣用氯仿 2 ml 搅拌使胆红素溶解并迅速过滤 , 滤纸和滤渣用 1 ml 氯仿洗涤仍迅速过滤 , 合并滤液和洗液作为供试品溶液 ( 避光 , 临用新制 )。
1. 3对照药材及对照品溶液制备 取人工牛黄对照药材10.12 mg, 加氯仿 1 ml, 超声处理 10 min, 静置 , 取上清液作为人工牛黄对照药材溶液 ；另取胆红素对照品 21.33 mg, 加氯仿 10 ml 溶解 , 作为胆红素对照品溶液 ( 避光 , 临用新制 )。
1. 4空白辅料溶液的制备 选取处方中几种最常用辅料 ：滑石粉、硫脲、淀粉、糊精、羧甲淀粉钠、十二烷基磺酸钠、吐温 -80、硬脂酸镁、蔗糖、微晶纤维素、二氧化硅 , 称取适量 ( 约相当于 3 片量 ), 研细 , 按“1.2”项下的处理方法制备 ,作为空白辅料溶液。
1. 5阴性对照溶液的制备 依照处方配比 , 称取对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺、马来酸氯苯那敏、咖啡因配制成缺少人工牛黄的阴性样品 , 研细 , 按“1.2”项下的处理方法制备 ,作为阴性对照溶液。
1. 6试验方法 照薄层色谱法 ( 中国药典 2010 版二部附录ⅤB) 试验 , 吸取四种制剂的供试品溶液、空白辅料溶液、阴性对照溶液及人工牛黄对照药材、对照品溶液各 10 μl, 分别点于同一硅胶 G 薄层板上 , 以甲苯 - 乙酸乙酯 - 冰醋酸(10∶1∶0.5) 为展开剂 , 展开 , 取出 , 晾干 , 立即检视。
2结果
置日光下检视 , 供试品色谱中 , 在与对照品及对照药材色谱相应的位置上 , 显相同的黄色斑点 ；空白辅料无干扰 ；阴性对照无干扰 , 见图 1。4 种制剂应用本方法主斑点均获得理想 Rf值。253 批复方氨酚烷胺制剂中 , 有 1 批在与对照品及对照药材色谱相应的位置上 , 无黄色斑点 , 未检出胆红素；若采用原标准中人工牛黄鉴别方法对该批样品进行鉴别 ,呈正反应。
3讨论
目前复方氨酚烷胺制剂中对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺、马来酸氯苯那敏、咖啡因质量基本稳定 , 只是人工牛黄存在问题较大 , 因为人工牛黄价格昂贵 , 且为动物药 , 成分繁多 ,质量控制复杂 ；而现行标准中 , 复方氨酚烷胺片［1］、复方氨酚烷胺胶囊［2］仅对人工牛黄中的胆酸进行化学鉴别 , 小儿复方氨酚烷胺片［3］、复方氨酚烷胺颗粒［4］仅对胆酸、猪去氧胆酸进行薄层鉴别 , 未对人工牛黄中价格较贵、治疗效果明显的胆红素进行控制 , 给企业在生产中弄虚作假提供可乘之机 , 其手法十分巧妙 , 用胆酸代替人工牛黄 , 鉴别实验却仍可成正反应 , 采用现行药品标准检验很难发现。以此不仅蒙骗消费者, 尚且能逃过监管机构的监督。因此, 制定检验方法,修订药品质量标准 , 对于确保人民群众的用药安全有效非常必要。
3. 1样品前处理 复方氨酚烷胺制剂处方中对乙酰氨基酚占比最大 , 人工牛黄占比较小 , 前者是后者的 25 倍 , 兼之其他几种组分的干扰 , 使直接点样时展开斑点拖尾严重且胆红素浓度太低斑点不清晰 ；胆红素见光受热均易氧化 , 在酸液中亦容易降解 , 不溶于水 , 溶于苯、氯仿、氯苯、二硫化碳及碱液中 , 微溶于乙醇、乙醚 , 作者尝试几种不同前处理［5, 6］方法对样品进行前处理 , 以期起到既使胆红素稳定又利于浓缩点样的目的。最终采取静置挥干氯仿进行浓缩 , 加少量氯仿溶解并过滤以除去干扰 , 展开效果较好。同时整个操作过程注意避光。
3. 2展开剂的选择 作者参考文献［6-9］分别采用环己烷:乙酸乙酯∶甲醇∶冰醋酸 (10∶3∶0.1∶0.1)、甲苯 - 乙酸乙酯 - 冰醋酸(10∶1∶0.5)、石油醚(30~60℃)-甲苯-冰醋酸(15∶5∶0.5)、石油醚 (30~60℃ )- 三氯甲烷 - 甲酸乙酯 - 甲酸 (20∶3∶5∶1)等展开系统展开。最终以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(10∶1∶0.5)为展开剂 , Rf值适中 , 斑点清晰无干扰 , 重现性好。
3. 3薄层板的选择 分别采用自制硅胶 G 薄层板、国产硅胶 G 预制板及进口硅胶 G 预制板进行展开实验 , 自制硅胶 G薄层板及国产硅胶 G 预制板均有拖尾现象 , 且在同一块板上进行多批检样时易出现“边缘效应”；进口硅胶 G 预制板斑点清晰无拖尾 , 在同一块板上进行多批检样时无“边缘效应”,Rf值均匀 , 稳定性好 , 能够适应大批量检验工作需要。
参 考 文 献
［ 1］ 国家药典委员会 . 化学药品地方标准上升国家标准 . 第 16 册 .北京 : 化学工业出版社 , 2002:278-279.
［ 2］ 国家药典委员会 . 中华人民共和国卫生部药品标准 ( 二部 ). 第5 册 . 中华人民共和国卫生部药典委员会 , 1996:60-61.
［ 3］ 国家药典委员会 . 化学药品地方标准上升国家标准 . 第 13 册 .北京 : 化学工业出版社 , 2002:128.
［ 4］ 国家药典委员会 . 化学药品地方标准上升国家标准 . 第 3 册 .北京 : 化学工业出版社 , 2002:203-204.
