尖锐湿疣(condylomaacuminatum,CA)是一种常见的性传播疾病,发病率呈逐年上升趋势,目前临床根据患者不同情况选择不同的治疗手段,但复发率一直比较高,对患者的心身健康造成严重影响。研究发现,机体细胞免疫功能下降可能是HPV的感染和发病的重要因素之一[1~3],然而,目前罕有中药局部治疗对皮损处皮肤免疫功能的影响的研究。本研究通过检测CA患者治疗前后的皮损T淋巴细胞亚群,以明确CA患者局部皮肤细胞免疫功能的变化,并探索出一种有效的治疗CA的办法。
1资料与方法
1.1临床资料:38例CA患者均为2013年1月至2014年1月我院皮肤科门诊患者,所有患者均符合2000年卫生部防疫司制订的CA诊断标准。18例为初发性CA,其中男性8例,女性10例,年龄在17~52岁,平均为32.16岁,病程1周~8个月,平均1.5个月;20例为复发性CA,其中男性12例,女性8例,年龄20~50岁,平均33.45岁,病程2周~1.5年,平均4.5个月。20名对照来自包皮环切术的正常皮肤,用于皮损T淋巴细胞亚群检测。
1.2免疫组化法检测皮损T淋巴细胞亚群:选取CA患者皮损组织及正常对照包皮组织,用10%甲醛溶液固定,制成蜡块,4tim切片后平铺于经多聚赖氨酸处理过的载玻片上,严格依照S-P免疫组化试剂盒的说明书对CD4和CD8细胞进行染色。以正常人淋巴结组织为阳性对照,以PBS代替一抗作为阴性对照。判定结果以真皮层细胞膜呈现棕黄色着色的淋巴细胞为阳性细胞,于高倍镜下(×400)随机观察5个视野,计数阳性细胞。
1.3操作步骤:治疗组患者局部皮损处皮肤常规消毒,用5%利多卡因注射液进行局部浸润麻醉,切取局部皮损,应用上述免疫组化法检测皮损处T淋巴细胞亚群。用CO2激光治疗仪除去可见疣体后,用自拟祛疣方药液进行坐浴治疗。该方剂由板蓝根、土茯苓、紫草、木贼、香附、萆薢、苦参组成。每种药各30g,加水至600mL,以文火煎20min,倒出药液,再同法煎20min取液,两液合一。药液温度以热感舒适为宜,坐浴,每次30~40min,2次/d,1付/d,每个疗程14d;4~8个疗程后停药,停药6个月后于原皮损处提取皮肤组织再次进行T细胞亚群检测。
2结果
CA患者治疗前后皮损处CD4+T细胞、CD8+T细胞均高于对照组,其差异有统计学意义(P<0.05);CA患者治疗后皮损处CD4+、CD8+T细胞较治疗前下降,且差异有统计学意义(P<0.01),见表1.
3讨论
尖锐湿疣治疗难点在于解决复发的问题。其复发的主要原因没有解决亚临床感染和潜伏感染。当然也与机体的细胞免疫功能低下密切相关。目前研究表明,HPV的激活和消退以及治疗效果很大程度上取决于患者的免疫功能,尤其是患者的细胞免疫功能,HPV能够逃避机体的免疫监视,而这正是尖锐湿疣高复发率的重要原因。
Coleman等认为,皮肤局部感染HPV后,感染部位皮肤的表皮与真皮中会出现大量细胞浸润,浸润细胞以淋巴细胞为主。Morelli等发现CA皮损组织中有中、重度T细胞为主的单核细胞浸润。本研究通过检测38例患者局部皮损,发现CD4+、CD8+T细胞在表皮及真皮中均有增高,且以CD8+T细胞增高更显着,说明尖锐湿疣患者皮损局部细胞免疫受到抑制。CA患者皮损的T淋巴细胞亚群数量变化,提示CA的发病和复发与局部细胞免疫功能具有相关性,因此对CA患者进行局部治疗,有可能对其产生积极的作用,其作用甚至强于系统治疗。
故而增强患者局部的细胞免疫功能,有可能达到减少复发的目的。本研究中,祛疣方治则为"清热、解毒、除湿".该方由板蓝根、土茯苓、紫草、香附、木贼、苦参、萆薢组成。板蓝根能清热解毒,具有抗病毒作用,能抵制尖锐湿疣病毒HPV的复制,与他药协同作用,促进尖锐湿疣赘生物疣体的消散;香附与木贼草具有软坚散结作用。由于CA好发于会阴部,温热潮湿之处。故加苦参、土茯苓、萆薢清热利湿,全方药物相互作用消除疣体,改善局部环境。本研究中,首选应用CO2激光去除疣体,然后进行中药液坐浴,清热解毒中药起到抗菌作用,从而达到去除局部病毒,防止创面感染,加快创口愈合。
最重要的可以达到既祛除原有病灶的病毒,又可以将潜伏病毒一并清除[4,5],提高治愈率,缩短疗程,减少复发,同时达到治疗和预防的目的。本试验对38例尖锐湿疣患者治疗前后皮损局部CD4+T细胞、CD8+T细胞及CD4+/CD8+比值的变化分别进行相关性分析,结果显示,CD4+T细胞、CD8+T细胞治疗前后与正常对照比较差异性均有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗前后比较差异性统有计学意义(P<0.05)。提示患者经祛疣方局部坐浴后,明显减少了原有皮损处CD4+及CD8+淋巴细胞阳性率。祛疣方中各中药对细胞毒性小、抗病毒作用强,可以避免在杀伤病毒的同时对正常细胞的损害。且其不良反应轻微,治疗无瘢痕形成及色素沉着,患者易于接受,值得临床推广。
参考文献:
[1]芦桂青,程浩,吴金民,等。尖锐湿疣病损组织粗提蛋白对树突细胞免疫表型的影响[J].中华皮肤科杂志,2003,36(2):102.