拟目乌贼(Sepia lycidas) 是我国重要的商业性乌贼渔业，隶属于软体动物门(Mollusca) 、头足纲(Cephalopoda) 、鞘亚纲 (Coleoidea) 、乌贼目(Sepiida) 、乌贼科(Sepiidae) 、乌贼属(Sepia) ，是栖息于大陆架、大陆斜坡上缘的海洋性岛屿周围的暖水性较强底栖种，广泛分布在印度洋—西太平洋，主要在我国的东海、南海、菲律宾海、越南和婆罗洲。其体型较大(最大胴长 40 cm，体质量5 kg) ，具肉质细嫩鲜美、营养价值高、生长迅速等特点，是一种极具开发前景的品种。目前关于拟目乌贼的研究主要集中在体内胶原蛋白的分离与鉴定、繁殖行为学、捕食行为、幼体 CO2耐受性和营养成分分析与评价等方面的研究。生态因子是海洋生物生长发育的重要因素之一，关于其生态学方面的研究资料还十分匮乏，生态因子对其幼体生长的研究鲜有报道。本实验以拟目乌贼幼体为研究对象，系统地研究了盐度的渐变与突变对摄食、行为、生长、存活以及体成分组成的影响，旨在确定其生长与存活的最佳盐度条件，以期为人工育苗和养殖提供理论依据和科学指导。
1、 材料与方法
1． 1 材料来源
试验于 3 ～6 月在浙江省舟山水产研究所试验基地进行。试验所用拟目乌贼幼体取自同一时间出膜，规格整齐、活力好、健康的幼体(平均体质量 0． 251 ±0． 011 g，平均胴长为 1． 073 ±0． 056cm) 。试验用自然海水经过暗沉淀与沙滤，盐度为 25 ～ 26，pH 7． 80 ～ 8． 10，温度 22 ℃ ～ 24 ℃，COD (6． 15 ～ 8． 44) mg / L。
1． 2 方法
1． 2． 1 盐度突变试验
幼体原培养盐度为 25 ～26，共设置 6 个突变盐度梯度，分别为18、21、24、27、30、33，各3 平行，每平行放 70 个幼体; 试验在 6 个 200 L 蓝色塑料桶(高 1． 30 m，直径 1． 20 m) 进行，每一个桶为一组，内置 3 个由 50 目筛绢网包裹有孔的圆塑料框(高 0． 4 m，直径 0． 35 m) 。高盐度海水以砂滤自然海水添加人工海水素配制而成; 低盐度海水以砂滤海水加地下淡水(充分曝气) 调配，用盐度计(手持式盐度计 S10) 标定各试验组的盐度，把盐度调节到各试验组盐度要求，保持盐度稳定。盐度调节稳定后把幼体置于各盐度梯度中，及时记录其行为表现。每天 50% 等盐换水，试验过程采取连续充气，7: 00 和 16: 00 投喂活体糠虾，投喂 1h 后把每组剩余糠虾捞出称重，观察记录死亡个体数和死亡个体大小，定时测量水温、盐度、pH、COD，观察和记录乌贼幼体行为。试验结束计算出成活率、增重率、特定增长率和饵料系数。培育条件: pH 为 8． 02 ～8． 13，COD (6． 15 ～8． 44) mg/L，温度(25 ± 0． 5) ℃ ，试验为期 21 d。
1． 2． 2 盐度渐变试验
幼体原培养盐度为 25 ～26，以每 6 h 升降盐度2 的速率调节盐度梯度(18、21、24、27、30、33) ，各 3 平行。培育条件: pH 为 8． 02 ～ 8． 13，COD(7． 58 ～9． 75) mg/L，温度(25 ±0． 5) ℃，试验为期 21 d。试验结束后整个活体取样，进行营养成分分析，其他条件同 1． 2． 1。
1． 3 样品采集与分析
盐度渐变试验结束后，禁食 1 d，每一平行组随机取 10 尾乌贼用于全个体成分分析，取样后于－ 80 ℃ 下储存备用。采用国标方法进行生化成分分析: 水分测定采用 105 ℃ 烘干恒重法(参照GB /T 5009． 3-2010) ; 粗灰分测定采用链式电阻炉550 ℃ 灼烧法(GB / T 5009． 4 － 2010) ; 粗蛋白质测定采用凯氏定氮法(GB/T 5009． 5 － 2010) ; 粗脂肪测定采用索氏抽提法(GB/T 5009． 6 －2003) 。
1． 4 测量指标
实验开始及结束时，禁食 1 d 后，使用电子天平称重 (精确至 0． 001 g) 。测量指标: 成活率、增重率、特定增长率、饵料系数。
成活率(SR，%) = 成活个数/总数 ×100%增重率(WG，%) = (末体重—初体重) /初体重 ×100%特定增长率(SGR，% /d) = (Ln 末体重-Ln 初体重) /实验天数 ×100%饵料系数(FCR) = 饵料消耗量(g) /乌贼质量增重量(g)1． 5 数据处理。
数据分析通过运用 SPSS 18． 0 统计分析软件进行相关分析、回归分析、ANOVAD 单因素分析和 Duncan 氏多重比较分析。
2、 结果与讨论
2． 1 不同盐度对拟目乌贼幼体生长与行为的影响
2． 1． 1 盐度突变对拟目乌贼生长的影响由表 1 可见，盐度突变对拟目乌贼的存活率有显著性影响(P ＜0． 05) ，当盐度从 26 突变≤18时，无 法 存 活; 当 盐 度 为 27 时，成 活 率 最 高(80． 4%) ，与 24 和 30 组相差不大(P ＞0． 05) ，与其他组之间差异显著(P ＜0． 05) 。盐度突变对其增重率与特定增长率影响显著(P ＜ 0． 05) ，盐度从 26 突变至 21 ～ 33，其增重率为 289． 9% ～513． 3% ，特定增长率 5． 2% / d ～ 8． 1% / d，盐度 21时最低 (289． 9%、5． 2% /d) ，盐度 27 时最高(513． 3%、8． 1% /d) ，27 组与 24 和 30 组相差不大(P ＞ 0． 05) ，与其他组之间存在差异 (P ＜0． 05) 。盐度 21 ～ 33 时，饵料系数 3． 3 ～ 5． 1，随着盐度的升高饵料系数呈先增后减的趋势，27 和30 组显著低于其它各组(P ＜ 0． 05) 。
2． 1． 2 盐度渐变驯化对拟目乌贼生长的影响由表 2 可见，在盐度渐变到各盐度梯度下，不同盐度对拟目乌贼的存活率、增重率、特定生长率和饵料系数均有显著性影响(P ＜ 0． 05) ，盐度在18 ～ 33 时，21 d 后拟目乌贼的幼体存活率为50． 6% ～ 84． 0% ，其存活率随着盐度升高呈先增后 减 的 趋 势; 当 盐 度 27 时，成 活 率 最 高(84． 0%) ，与 24 和 30 组相差不大(P ＞0． 05) ，与依次降低的 33、21、18 组之间差异显著(P ＜0． 05) 。增重率 326． 5% ～ 622． 7% ，特定增长率5． 8% / d ～ 9． 1% / d，均随着盐度升高先增后减，盐度18 时最低(326． 5%、5． 8% /d) ，盐度27 时最高(622． 7%、9． 1% /d) ，27 组与30 组相差不大(P ＞0． 05) ，与依次降低的 24、30、21、18 组之间存在差异 (P ＜0． 05) 。盐度 18 ～33 时，饵料系数 3． 0 ～5． 4，随着盐度的升高饵料系数呈先增后减的趋势，盐度 18 组最高(5． 4) ，27 组最低(3． 0) ，27 和30 组显著低于其它各组(P ＜ 0． 05) 。
2． 1． 3 盐度突变对拟目乌贼行为的影响由表 3 可出，当盐度由 26 突变大于 33 或小于 21 时，入水后表现异常，体色变色，喷墨等现象; 盐度24 ～30 时，乌贼表现正常。盐度21 和33时，虽然入水后有些异常，但稍后就能缓和，随后很快安静。所以当盐度 ＜21 或 ＞33 时，会导致其无法适应，行为表现异常，导致短时间死亡。
盐度是影响海洋动物生长、发育的重要生态因子之一，对其幼体影响尤为特出，由于身体机能的不完善，生长发育过程对盐度的改变反应极为敏感，当盐度超过一定范围会影响到它们的生长发育。盐度对海洋生物生长、发育的影响主要体现在对其内部生理反应上，当盐度超过适宜范围时，导致其体内外渗透压的平衡失态，从而影响其呼吸代谢、能量收支和生殖发育等相关指标，在养殖过程中，适宜的水体盐度与合理的盐度调节模式，不仅能降低水产动物病害爆发频率，而且对于海水动物低盐度养殖及人工育苗具有重要的经济意义和科学指导意义。所以探索其适宜生长盐度对行为、生理生化反应、生长发育等具有重要的意义。本实验结果表明，不同盐度对拟目乌贼幼体的存活、生长和饵料系数有显著影响，这与虎斑乌贼(Sepia pharaonis)、曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)、金乌贼 (S． esculen-ta)、嘉庚蛸(Octopus tankahkeei)的研究结果一致。
实验发现盐度渐变和盐度突变对拟目乌贼幼体的存活、生长和饵料系数有显著性的影响。存活率、特定生长率和增重率含量随着盐度升高先增后减，饵料系数则是先减后增加的趋势。在低盐或者高盐的环境下会导致幼体消耗了过多的能量用于渗透压调节，从而导致影响储存能量用于生长，这可能是高盐或低盐导致特定生长率降低、饵料系数升高的原因。但这两种驯养模式下拟目乌贼幼体存活盐度范围和相同盐度下的存活率、增重率、特定生长率和饵料系数相互之间均存在差异，在盐度渐变下，幼体存活的盐度范围为 18～ 33，而盐度突变下，幼体存活的盐度范围仅为21 ～ 33，可见其对盐度波动幅度的耐受能力有限的，渐渐地改变盐度可以让其适应更低的盐度。
盐度渐变下其存活率、增重率、特定生长率和饵料系数均优于盐度突变; 如同样是盐度 21，盐度渐变幼体的存活率、特定生长率和饵料系数分别为:60． 0% 、6． 6 % / d、4． 7，而盐度突变幼体的存活率、特定生长率和饵料系数分别为 46． 7%、5． 2% / d、5． 1。这表明盐度渐变能使幼体适盐范围比突变更大，这可能是慢慢改变盐度，能让幼体充分调节身体机能去适应环境改变，以防环境突然大范围改变超越其调节范围。张玉玉等用盐度突变与盐度渐变两种方法测定长蛸的盐度耐受性，发现长蛸个体也随着胁迫加大变得越来越不适应，细胞内与免疫和消化相关的细胞器由于细胞吸水或失水作用功能受到影响，免疫机能降低，呼吸作用减弱，体内供氧降低，盐度突变比渐变更显著。突变后幼体的存活率、特定生长率低于盐度渐变，饵料系数高于盐度渐变，可见盐度突变带来影响更大。短时间内盐度变化幅度过大，可能对其对其身体机能产生一定程度的受损，从而影响其生长、发育，到从导致盐度渐变下其存活率、增重率、特定生长率和饵料系数均优于盐度突变法。从行为观察可见短时间内盐度变化幅度过大会导致其无法适应，其会表现出，四处乱窜、体色改变、喷墨、腕伸展散开现象。
通过盐度渐变和盐度突变对拟目乌贼幼体的存活、生长和饵料系数影响结果来看，拟目乌贼生长适宜盐度范围为 21 ～ 33，最适范围为 27 ～ 30，这与虎斑乌贼(Sepia pharaonis)适宜盐度 24． 0～ 33． 0、曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)适宜盐度 20． 0 ～30． 0 差异不显著，而与金乌贼(S．esculenta)适宜盐度 24 ～ 37、嘉庚蛸(Octopustankahkeei)适宜盐度 16 ～27 差异显著，这可能与物种、分布区域与习性等有关。在养殖、育苗过程中，遇到台风、暴雨天气及时做好防范设施，因为这样天气可能会导致养殖塘的盐度发生一定的变化，如果盐度的突变幅度超过一定范围，就会影响其生长、存活。
2． 2 不同盐度对对拟目乌贼体成分组成的影响由表 4 可出，不同盐度(18 ～33) 对拟目乌贼全体的水分、粗蛋白含量均有显著性影响(P ＜0． 05) ，水分含量为 82． 37% ～ 85． 74% ，水分的含量随着盐度的随着盐度升高而减少; 粗蛋白含量为 8． 07% ～ 10． 64%，27 和 30 组 相 近 (P ＞0． 05) ，粗蛋白含量最高(10． 26% ～ 10． 64%) 与依次降低的 33、24、21、18 组存在差异 (P ＜0． 05) 。而对粗脂肪和灰分的含量均无显著影响，粗脂肪含量为 10． 14% ～ 11． 23%，灰分含量为 4． 30% ～5． 64%。
根据结果来看，其体水分的含量随盐度升高而降低，这与黄凯等研究中发现南美白对虾(Penaeus vannamei) 的虾体水分含量随着养殖水体盐度升高而降低的结果一致，但是李小勤等发现盐度对草鱼(Ctenopharn-godon idellus) 体水分含量无影响，刘贤敏等也发现盐度对奥尼罗非鱼(Oreochromis nilotic-us × O． aureus)) 和乌鳢(Channa argus) 肌肉水分含量无影响。可能与物种生活习性有关，拟目乌贼与南美白对虾同属于海水品种，而草鱼、奥尼罗非鱼和乌鳢同属于淡水品种。在高盐度环境中，为了适应环境导致身体失去一部水，来维持体内外渗透压的平衡，因此，这可能是导致其体内水分含量随盐度增高而降低的缘故。蛋白质含量随着盐度升高而先增后减的趋势，这与发现南美白对虾的虾体蛋白质含量随盐度升高而增高的结果有一定差异性，与盐度对奥尼罗非鱼和乌鳢肌肉蛋白质含量影响的研究结果一致。生活在低渗环境或高渗环境中，需要消耗了过多能量去调节身体机能的各种反应，从而导致在糖不足的时候，其体内蛋白质部分转化为糖提供能量，这可能导致其体内的蛋白质含量在适宜的盐度下比其它盐度含量高的原因。盐度对粗脂肪和灰分的含量均无显著影响，这与在南美白对虾、草鱼、奥尼罗非鱼和乌鳢的研究中一致。
3、 结 论
(1) 盐度渐变和盐度突变对拟目乌贼幼体的存活、生长和饵料系数均存在显著的影响(P ＜0． 05) ，存活率、特定生长率、增重率随着盐度升高先增后减，饵料系数先减后增。盐度突变比盐度渐变的影响更突出，当盐度突变范围大于 9 会导致其死亡。盐度慢慢地(以每 6 h 升降盐度 2的速率) 改变可让其适应更低的盐度。其生长适宜的盐度是 21 ～33，最适盐度为 27 ～30。
(2) 不同的盐度对其体水分含量和粗蛋白质含量有显著的影响(P ＜0． 05) ，其粗脂肪和灰分影响不显著(P ＞0． 05) 。粗蛋白质含量随着盐度升高先增后减，水分含量随着盐度升高而增加的趋势。
参考文献:
［1］陈新军，刘必林，王尧耕． 世界头足类［M］． 北京: 海洋出版社，2009: 440-441．
［2］蒋霞敏，彭瑞冰，罗 江，等． 野生拟目乌贼不同组织营养成分分 析 及 评 价［J］． 动物营养学报，2012，24 (12) :2392-2401．
