浆膜腔积液是临床中最为常见的一种体征,炎症和肿瘤是引起积液的主要原因。积液性质的诊断以往主要通过涂片进行,但是由于常规涂片法存在涂片厚、细胞重叠、结构不清、细胞量少、阳性检出率低等缺点[1 -2],使得诊断的敏感性仅为 50% ~78%[3].细胞块技术基本原理是将样品离心,使其中的细胞和微小组织块浓缩后固定,石蜡包埋后切片染色观察。细胞块通过石蜡包埋后类似组织块,可以连续切片及永久性保存标本,弥补了传统涂片的不足,还可以进行进一步相关检测。关于细胞块技术的应用在文献中可见零星报道,制备方式也各异,本研究通过对比四种浆膜腔积液细胞块制作方法,试图找到一种更适合基层医院推广开展的细胞块制作方法。
1 材料与方法
1. 1 材料 收集桂林医学院附属医院 2010 - 2012年间的浆膜腔积液标本 80 例,积液量 50 ~ 200 ml,其中胸腔积液 53 例,腹腔积液 27 例,样本包含略浑浊的积液 35 例为第一组; 血性积液或浑浊的积液45 例为第二组。
1. 2 方法 把每例样本分作 4 份,按下列步骤进行操作: 所有样本在一次性 10 ml 塑料试管中离心2 000 r / min,离心 5 min,之后将沉淀部分做以下处理①将试管内上清液去除,加入适量 95% 乙醇之后再次离心2 000 r/min、5 min,去除上清液之后,用手术剪在距试管底部沉淀物上方 0. 1 ~0. 2 cm 处剪去上段试管,再将试管底部剪出一个小口子,便于脱水剂穿透。将装有沉淀物的试管底端用拭镜纸包好后放入包埋盒中( 试管包埋法) .②将试管内上清液去除,尽可能用镊子将在底部的沉淀物取出,用拭镜纸包好后放入包埋盒中( 普通离心沉淀法) .③将试管内上清液去除,用滤纸尽可能吸去多余水分,在其中加入人血清液混匀后再次离心,取沉淀物用拭镜纸包好后放入包埋盒中。④将试管内上清液去除,用滤纸尽可能吸去多余水分,在其中加入适量融化的琼脂混匀,待冷凝固后,取出沉淀物放入包埋盒中。以上 4 种细胞块制作完成后,均放入 95% 乙醇中固定 1 h,经过常规脱水透明,包埋,HE 制片。
1. 3 结果判定
1. 3. 1 成功率判定 细胞沉渣能够制作成细胞块,沉渣大部分能够聚拢在 2 cm ×2 cm 的范围内,并能够制成切片就认定为制作细胞块成功,可以允许有一些沉渣散落。
1. 3. 2 细胞块完整性判断 细胞蜡块制成后,细胞保留完整,结合性较好,几乎没有或及有少量的散落细胞,能够完整制片,即为具有完整性。
1. 4 统计学分析 所得数据,应用 SPSS15. 0 统计软件进行处理,各组间比较应用 χ2检验。